| RNAi技术抑制HCMV-IE1表达的在体实验研究 |
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| 引用本文： | 谢妮,袁建辉,韩艳萍,吴瑾滨.RNAi技术抑制HCMV-IE1表达的在体实验研究[J].国际病理科学与临床杂志,2010,30(6). |
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| 作者姓名： | 谢妮 袁建辉 韩艳萍 吴瑾滨 |
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| 作者单位： | 深圳大学附属第一医院;深圳市第二人民医院医学实验中心;深圳市疾病预防控制中心; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，广东省深圳市科技计划项目 |
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| 摘 要： | 目的:研究RNA干扰(RNA interference,RNAi) 对体内人类巨细胞病毒-立即早期基因1(human cytomegalovirus immediate-early gene 1,HCMV-IE1)表达的沉默作用,为靶向HCMV-IE1的基因治疗提供科学的实验依据.方法:选取60只雄性昆明种小鼠,并分为3组,分别为实验对照组(注射生理盐水)、病毒感染组(注射HCMVAD169株病毒液)和RNA干扰组(染毒后第2天注射转染了表达RNAi载体的人胚肺成纤维细胞液);采用PCR法检测小鼠体内HCMV基因的表达水平;采用ELISA检测动物血清中HCMV-IgM的含量;采用免疫组织化学和Western免疫印迹技术分别测定小鼠体内HCMV-IE1的蛋白水平.结果:PCR结果表明干扰组比病毒感染组的HCMV的基因表达下调20%;ELISA结果表明RNAi能使动物血清中HCMV的含量降低为19%;免疫组织化学和Western免疫印迹结果证实,干扰组和病毒感染组的HCMV-IE1蛋白水平分别降低为17.6%和18.5%.结论:RNAi技术能有效地抑制目的基因在体内的表达,有可能用于靶向HCMV-IE的基因治疗.
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| 关 键 词： | RNA干扰 人类巨细胞病毒 感染 基因表达 基因治疗 |
Silence of HCMV-IE1 gene by RNA interference in vivo |
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| XIE Ni,YUAN Jianhui,HAN Yanping,WU Jingbin.Silence of HCMV-IE1 gene by RNA interference in vivo[J].Journal of International Pathology and Clinical Medicine,2010,30(6). |
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| Authors: | XIE Ni YUAN Jianhui HAN Yanping WU Jingbin |
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| Institution: | XIE Ni1,YUAN Jianhui2,HAN Yanping1,WU Jingbin1(1.Center for Experimental Medical Research,First Affiliated Hospital of Shenzhen University,Second People's Hospital of Shenzhen,Shenzhen 518035,2.Shenzhen Center For Disease Control and Prevention,Shenzhen 518020,China) |
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| Abstract: | Objective To evaluate the silence effect of RNAi on human cytomegalovirus immediate-early gene 1(HCMV-IE1) in vivo and provide the data for gene therapy of human cytomegalovirus(HCMV).Methods Sixty Kunming male mice were randomly divided into 3 groups: an infection group(n=20),injected with HCMVAD169;a control group(n=20),injected with saline solution;and an interfering group(n=20),injected with human embryonic lung fibroblast(HEL) expressed RNAi.The expression of HCMV-IE1 mRNA and protein and HCMV IgM leve... |
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| Keywords: | RNA interference human cytomegalovirus infection gene expression gene therapy |
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