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| 慢病毒携带shRNA抑制CR-1基因表达对 CNE-2细胞特性的影响 | |
| 引用本文： | 吴正蓉,吴立蓉,姚开泰. 慢病毒携带shRNA抑制CR-1基因表达对 CNE-2细胞特性的影响[J]. 中山大学学报(医学科学版), 2009, 30(6) |
| 作者姓名： | 吴正蓉 吴立蓉 姚开泰 |
| 作者单位： | 1. 南方医科大学,南方医院病理科//基础医学院病理学系//教育部广东省共建人类重大疾病转录组学和蛋白组学重点实验室//广东省分子肿瘤病理重点实验室,广东,广州,510515 2. 南方医科大学,广州中医药大学中药学院,广东,广州,510006 3. 南方医科大学,基础医学院肿瘤研究所,广东,广州,510515 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金省部联合基金 |
| 摘 要： | 【目的】 应用慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)技术,有效沉默鼻咽癌细胞CNE-2的CR-1基因表达,研究CR-1对鼻咽癌细胞生物学行为的影响&;#65377; 【方法】 构建针对CR-1的siRNA慢病毒表达载体[含H1启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]&;#65377;利用包装细胞293FT生产慢病毒,感染鼻咽癌细胞CNE-2, 流式筛选GFP阳性细胞&;#65377;应用荧光定量PCR&;#65380;Western blot检测病毒感染后CNE-2细胞中CR-1基因的mRNA和蛋白表达,获得干扰CR-1基因的细胞群&;#65377;并用MTT法&;#65380;平板克隆形成实验及Boyden侵袭小室观察CR-1干扰后对CNE-2细胞生物学行为的影响&;#65377; 【结果】 PCR 和测序证实,成功构建了CR-1 shRNA的慢病毒载体pLVTHM-shCR-1&;#65377;荧光定量PCR 和Western blot结果表明,所获得的细胞中CR-1 mRNA及蛋白表达水平较阴性对照组&;#65380;空白对照组均显著降低(P < 0.05)&;#65377;CR-1干扰后的细胞生长明显减慢,克隆形成能力减弱,侵袭运动能力下降&;#65377; 【结论】 通过RNAi技术阻断CR-1的表达,可抑制CNE-2细胞的生长&;#65380;增殖&;#65380;迁徙,提示CR-1在鼻咽癌的发生&;#65380;发展过程中起重要作用&;#65377; |
| 关 键 词： | RNA 干扰 慢病毒 CR-1 鼻咽癌 |
| 收稿时间： | 2009-03-21; |
Inhibition of CR-1 Expression by Lentivirus Mediated shRNA Modulates Biological Features of Human Nasopharyngeal Carcinoma CNE-2 Cells |
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| Abstract: | |
| Keywords: | CR-1 RNA interferenee lentivirus,CR-1 nasopharyngeal carcinoma |
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