胰腺癌MUC1 mRNA转染树突细胞疫苗诱导特异性抗肿瘤的免疫反应 |
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引用本文: | 陈江,郭晓钟,李宏宇,邵晓东,刘旭,赵佳钧,王迪.胰腺癌MUC1 mRNA转染树突细胞疫苗诱导特异性抗肿瘤的免疫反应[J].中华胰腺病杂志,2012,12(3). |
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作者姓名: | 陈江 郭晓钟 李宏宇 邵晓东 刘旭 赵佳钧 王迪 |
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作者单位: | 沈阳军区总医院消化科,沈阳,110016 |
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摘 要: | 目的 研究人胰腺癌MUC1 mRNA转染树突细胞(DC)诱导的特异性抗肿瘤免疫反应,为DC疫苗治疗胰腺癌提供实验依据.方法 从外周血中分离单核细胞(PBMC)并培养成DC,从细胞形态和表面标志进行鉴定.通过RT-PCR扩增胰腺癌MiaPaCa-2细胞的MUC1 mRNA后用电穿孔法将其转染DC.采用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测培养不同时间点DC的MUC1的表达.用四甲基偶氮唑蓝法检测DC存活率.采用51Cr标准细胞毒实验观察转染MUC1 mRNA的DC诱导的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应;应用ELASA法检测CTL的IFN-γ释放量.结果 培养获得的细胞呈现典型的DC形态特征和表面标志(CD40+、HLA-DR+、CD83+、CD86+).MUC1 mRNA转染DC48 h后,细胞MUC1 mRNA表达水平最高,为38.43(36.89 ~48.06),蛋白表达亦最强.转染后DC的存活率稳定在80%左右.转染MUC1 mRNA的DC可有效诱导HLA-A2 +/MUC+特异性CTL免疫反应;胰腺癌Capan-2细胞与转染MUC1的DC刺激MUC1特异性CTL的24 h IFN-γ释放量分别为(28.44±4.96)和(16.31 ±2.54) U/ml,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 人胰腺癌MUC1 mRNA体外转染DC后可诱导CTL产生特异性抗肿瘤免疫反应.
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关 键 词: | 树突细胞 RNA 信使 转染 胰腺肿瘤 T淋巴细胞 细胞毒性 |
Induction of specific anti-tumor immune responses against pancreatic cancer by transfected dendritic cells with pancreatic cancer MUC1 mRNA |
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Authors: | CHEN Jiang GUO Xiao-zhong LI Hong-yu SHAO Xiao-dong LIU Xu ZHAO Jia-jun WANG Di |
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Abstract: | |
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Keywords: | Dendritic cells RNA messenger Transfection Pancreatic neoplasms T-lymphocytes cytotoxic |
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