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| 胰腺癌细胞株PANC1异常甲基化miRNA的分析 | |
| 引用本文： | 彭泉,张立洁,蔡辉华,高文涛,赵成功,钱祝银,苗毅. 胰腺癌细胞株PANC1异常甲基化miRNA的分析[J]. 中华胰腺病杂志, 2012, 12(1) |
| 作者姓名： | 彭泉 张立洁 蔡辉华 高文涛 赵成功 钱祝银 苗毅 |
| 作者单位： | 1. 解放军第105医院普外科,安徽合肥,230032 2. 解放军第105医院肿瘤科,安徽合肥,230032 3. 南京医科大学第一附属医院普外科 |
| 基金项目： | 江苏省自然科学基金，人事部留学回国人员基因项目 |
| 摘 要： | 目的 分析胰腺癌细胞株PANC1与正常胰腺组织表达有差异的启动子区甲基化miRNA,寻找与胰腺癌相关的高甲基化miRNA.方法 抽提PANC1与正常胰腺组织基因组DNA,超声断裂.应用抗5-甲基化嘧啶核苷抗体和免疫磁珠法获取甲基化DNA片段.通过DNA甲基化芯片筛选出PANC1与正常胰腺组织表达差异的高甲基化miRNA,采用重亚硫酸盐修饰的PCR (BSP)和TA克隆测序的方法进行验证.提取胰腺癌细胞株BxPC3、CFPAC1、PANC1、SW1990基因组DNA,采用结合重亚硫酸盐的限制性内切酶法(combined bisulfite restriction analysis,COBRA)验证芯片筛选出的差异表达的甲基化miRNA.结果 PANC1细胞与正常胰腺组织存在8个差异表达的甲基化miRNA,从中挑选出5个进行BSP+ TA克隆测序验证,其中miR-615、miR-663、miR-663b在PANC1细胞的甲基化率明显高于正常组织(60.6％比7.6％,88.8％比22.2％,94.4％比13.0％)；miR-675的甲基化率与正常胰腺组织无明显差异(76.0％比100％)；miR1826因测序结果误差较大而舍去.经COBRA验证,PANC1的上述4种miRNA均高甲基化；BxPC除miR-675外,其他3种均高甲基化；CFPAC1的miR-663、miR-663b高甲基化；SW1990的miR-615、miR-663高甲基化.结论 胰腺癌细胞株与正常胰腺组织间存在差异表达的高甲基化miRNA,其中miR-663高甲基化与胰腺癌可能相关. |
| 关 键 词： | 胰腺肿瘤 DNA甲基化 微RNAs TA克隆 |
Abnormal methylation of miRNA in pancreatic cancer cell line PANC1 |
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| PENG Quan , ZHANG Li-jie , CAI Hui-hua , GAO Wen-tao , ZHAO Cheng-gong , QIAN Zhu-yin , MIAO Yi. Abnormal methylation of miRNA in pancreatic cancer cell line PANC1[J]. CHINESE JOURNAL OF PANCREATOLOGY, 2012, 12(1) | |
| Authors: | PENG Quan ZHANG Li-jie CAI Hui-hua GAO Wen-tao ZHAO Cheng-gong QIAN Zhu-yin MIAO Yi |
| Abstract: | |
| Keywords: | Pancreatic neoplasms DNA methylation miRNA TA cloning |
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