| 腺病毒介导神经生长因子在绿色荧光蛋白基因标记的间充质干细胞中表达及意义 |
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| 引用本文： | 施永彦,喻爱喜,张功礼,余永桂,邓长康,潘国栋. 腺病毒介导神经生长因子在绿色荧光蛋白基因标记的间充质干细胞中表达及意义[J]. 中华实验外科杂志, 2006, 23(5): 623-624,F0003 |
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| 作者姓名： | 施永彦 喻爱喜 张功礼 余永桂 邓长康 潘国栋 |
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| 作者单位： | 1. 430071,武汉大学中南医院骨科
2. 郧阳医学院附属人民医院骨科 |
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| 基金项目： | 湖北省教育厅青年基金资助项目（200524003） |
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| 摘 要： | 目的为提高间充质干细胞(MSCs)表达神经生长因子(NGF)的能力,同时使MSCs 被绿色荧光蛋白(GFP)稳定标记,探讨通过病毒载体将NGF和GFP基因高效转染到MSCs的方法。方法取2个月龄100～150 g Wistar大鼠,全骨髓法分离培养纯化大鼠MSCs,利用携带人 NGFβ基因的复制缺陷性重组腺病毒(Ad-hNGFβ)和携带GFP基因的复制缺陷性逆转录病毒(Rt- GFP)转染MSCs,荧光显微镜观察GFP阳性的MSCs,免疫细胞化学和Western blot检测hNGFβ的表达。结果 Rt-GFP转染后,80％～90％MSCs可激发出明亮的绿色荧光,且荧光不随培养时间延长和传代次数增加而衰减。Ad-hNGFβ的转染MSCs中hNGFβ阳性率(90．17±2．14)显著高于阴性对照组(2．17±0．75,P<0．01)和空白对照组(1．83±0．98,P<0．01),转染后MSCs中NGFβ表达量(188．67±8．71)显著高于阴性对照组(25．67±4．08,P<0．01)和空白对照组(27．50± 3．33,P<0．01)。结论 Ad-hNGFβ可以高效转染MSCs,实现NGF在MSCs中高效表达,Rt-GFP 可以使MSCs获得长效标记。
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| 关 键 词： | 骨髓问充质干细胞 神经生长因子 绿色荧光蛋白 基因转染 |
| 收稿时间： | 2005-11-12 |
| 修稿时间： | 2005-11-12 |
Adenovirus-mediated nerve growth factor expression in mesenchymal stem cells labeled with green fluorescent protein gene |
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| SHI Yong-yan,YU Ai-xi,ZHANG Gong-li,et al.. Adenovirus-mediated nerve growth factor expression in mesenchymal stem cells labeled with green fluorescent protein gene[J]. Chinese Journal of Experimental Surgery, 2006, 23(5): 623-624,F0003 |
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| Authors: | SHI Yong-yan YU Ai-xi ZHANG Gong-li et al. |
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| Affiliation: | SHI Yong-yan,YU Ai-xi,ZHANG Gong-li,et al.Department of Orthopedics,Zhongnan Hospital of Wuhan University,Wuhan 430071,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mesenchyrnal stem ceUs Nerve growth factor Green fluorescent protein Gene transfection |
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