| 重组日本血吸虫虫卵核糖核酸酶SjCP1412体外抑制肝星状细胞LX-2活化作用的研究 |
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| 作者姓名： | 李其凤 宋丽君 杨莹莹 董盼盼 梅丛进 李溢鑫 张键锋 熊春蓉 余传信 杨坤 |
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| 作者单位： | 1. 南京医科大学公共卫生学院;2. 江苏省血吸虫病防治研究所国家卫生健康委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（82173586,81802035）； |
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| 摘 要： | 目的 观察重组日本血吸虫虫卵核糖核酸酶SjCP1412(r SjCP1412)对体外培养的人肝星状细胞LX-2增殖、细胞周期、凋亡及活化的作用，并探索其潜在机制。方法 在大肠埃希菌BL21中采用原核表达方式表达rSjCP1412蛋白，并通过Ni-NTA亲和层析法及尿素梯度复性透析制备高纯度可溶性rSjCP1412蛋白。使用12.5、25.0、50.0μg rSjCP1412蛋白分别于37℃酶解酵母RNA 2、3、4 h，酶解产物采用1.5%琼脂糖凝胶电泳分析，观察rSjCP1412蛋白RNA酶活性。采用CCK-8法检测经不同浓度rSjCP1412蛋白刺激48 h后LX-2细胞增殖，采用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡双染法检测经不同浓度rSjCP1412蛋白刺激48 h后LX-2细胞凋亡，采用DAPI染色法检测经不同浓度rSjCP1412蛋白刺激48 h后LX-2细胞周期中G0/G1、S、G2/M期细胞百分比，采用荧光实时定量PCR(qPCR)检测经不同浓度rSjCP1412蛋白刺激48 h后LX-2细胞中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）mRNA表达水平；...
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| 关 键 词： | 日本血吸虫 核糖核酸酶 SjCP1412 肝星状细胞 Smad4信号通路 |
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