肿瘤坏死因子-α增加肾入球动脉平滑肌细胞胞内钙离子浓度的机制

目的观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对肾入球动脉平滑肌细胞(RASMCs)内钙离子浓度(〔Ca2+〕i)的影响。方法应用筛网及酶消化法进行原代雄性SD大鼠RASMCs的分离与培养,将原代培养的RASMCs透射电镜下观察肌丝进行鉴定。实验分组:A1组:内皮素刺激组;A2组:TNF-α+内皮素刺激组;B1组:2-氨基乙基二苯硼酸盐(2-APB)+内皮素刺激组;B2组:TNF-α+2-APB+内皮素刺激组。采用confocal显微镜测定单个活细胞内Ca2+荧光强度,计算细胞内〔Ca2+〕i。结果原代RASMCs呈梭形或三角形等;传代RASMCs多呈梭形或长梭形。透射电镜见细胞胞质内大量纵行束样分布的肌丝。各组静息状态下RASMCs内〔Ca2+〕i比较无显著差异(P>0.05)。A1组内皮素刺激后RASMCs内〔Ca2+〕i与加内皮素前比较显著增高(P<0.01);A2组〔Ca2+〕i较A1组显著增高(P<0.01);B1、B2组内皮素刺激后RASMCs内〔Ca2+〕i较A1组显著降低(P<0.01),与加内皮素前比较无显著差异(P>0.05)。结论 TNF-α可增强内皮素刺激引起的RASMCs内〔Ca2+〕i增加,且通过1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3R)发挥作用。