真菌DNA提取方法的建立和比较燃 |
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引用本文: | 杨艳秋,王丽,贺丹,孙文通,张宇,横山耕治. 真菌DNA提取方法的建立和比较燃[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2007, 11(50): 10093-10096 |
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作者姓名: | 杨艳秋 王丽 贺丹 孙文通 张宇 横山耕治 |
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作者单位: | [1]吉林大学第一医院,吉林省长春市130021 [2]吉林大学基础医学院病原生物学教研室,吉林省长春市130021 [3]日本国立千叶大学真菌医学研究中心,日本千叶260-8673 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(30571773);吉林省科技发展计划重点资助项目(20050205-3) |
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摘 要: | 目的:DNA的提取效率,尤其是DNA的纯度严重影响实验结果,同一标本采用不同方法或不同标本采用相同方法提取DNA,其纯度和提取率有很大差异。以丝状真菌为材料,进行DNA提取,对真菌DNA的提取方法进行优化,探讨其最佳DNA提取方法。方法:实验于2004—06/2006—12在吉林大学基础医学院真菌实验室进行。以临床常见致病真菌标本为材料,采用玻璃珠-盐析法、CTAB法、Gene TLE^TM法3种不同方法提取DNA,通过琼脂糖凝胶电泳比较不同方法提取DNA的效率。结果:同等菌体量下,A260和A80的比值采用Gene TLE^TM法获得的样品最高,表明其蛋白质含量相对最少。3种提取的基因组DNA琼脂糖凝胶电泳图都在相应的多重PCR体系中扩增出目的片段,Gene TLE^TM DNA抽提法带型最清楚、明亮。结论:Gene TLE^TM法提取DNA效率高、质量好,操作简单,适于DNA的提取.
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关 键 词: | 丝状真菌 基因组DNA提取 Gene TLE^TM法 |
文章编号: | 1673-8225(2007)50-10093-04 |
修稿时间: | 2007-09-06 |
Comparison of three methods of genomic DNA extraction from fungus |
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