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金复康口服液诱导肺癌细胞A549凋亡的机制
引用本文:蒋义鑫,徐元,周之毅,章丹丹. 金复康口服液诱导肺癌细胞A549凋亡的机制[J]. 中国实验方剂学杂志, 2018, 24(9): 160-165
作者姓名:蒋义鑫  徐元  周之毅  章丹丹
作者单位:上海中医药大学 交叉科学研究院, 上海 201203,上海中医药大学 交叉科学研究院, 上海 201203,上海中医药大学 附属龙华医院, 上海 200032,上海中医药大学 交叉科学研究院, 上海 201203
基金项目:国家自然科学基金项目(81773946,81573673,81001666);上海市教委创新项目(13YZ048);上海市卫计委青年项目(20144Y0143);上海市教委优青项目(SZY07029)
摘    要:目的:研究金复康口服液(JFK)诱导人非小细胞肺癌细胞A549凋亡的作用机制。方法:取对数生长期的人非小细胞肺癌细胞A549,随机分为空白组和药物组,采用溴化四甲基偶氮(MTT)比色法,考察不同质量浓度JFK(0.3,1.5,3,7.5,15,30 g·L~(-1))对A549细胞体外增殖能力的影响。通过平板克隆形成实验考察JFK对A549细胞平板克隆形成的影响,利用流式细胞仪考察JFK对A549细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)考察JFK对裂解DNA修复酶(cleaved PARP),活化型半胱天冬酶-3(actived Caspase-3),Wnt/β-联蛋白(β-catenin),细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的蛋白表达及对促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路和蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响,实验中设置空白组和药物组,药物组为A549细胞加入15,30 g·L~(-1)JFK,分别干预24 h,30 min。结果:JFK在1.5~30 g·L~(-1)呈质量浓度依赖性的抑制A549细胞外增殖(P0.01)。JFK抑制A549细胞的平板克隆形成在15~30 g·L~(-1),其中JFK 30 g·L~(-1)时抑制A549细胞的平板克隆最显著(P0.01)。与空白组比较,JFK 15~30 g·L~(-1)可提高AnnexinⅤ和PI双阳细胞率,诱导A549细胞凋亡(P0.05),且呈浓度依赖性提高cleaved PARP和actived Caspase-3的蛋白表达,并抑制β-catenin和cyclin D1在蛋白水平的表达(P0.05,P0.01)。JFK上调MAPK信号通路中JNK和p38的蛋白磷酸化水平(P0.05),同时下调Akt信号通路中Akt在T308和S473的位点磷酸化水平(P0.05)。结论:金复康口服液抑制人非小细胞肺癌细胞A549的体外增殖、平板克隆的形成并诱导其凋亡,部分通过调控JNK/p38/MAPK信号通路和Akt信号通路,抑制β-catenin和cyclin D1,同时提高凋亡相关蛋白cleaved PARP和actived Caspase-3的表达。

关 键 词:金复康口服液  非小细胞肺癌  细胞凋亡  促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路  蛋白激酶B (Akt)信号通路
收稿时间:2017-09-01

Mechanism of Jinfukang Oral Liquid in Inducing Apoptosis of Non-small Cell Lung Cancer Cell Line A549
JIANG Yi-xin,XU Yuan,ZHOU Zhi-yi and ZHANG Dan-dan. Mechanism of Jinfukang Oral Liquid in Inducing Apoptosis of Non-small Cell Lung Cancer Cell Line A549[J]. China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2018, 24(9): 160-165
Authors:JIANG Yi-xin  XU Yuan  ZHOU Zhi-yi  ZHANG Dan-dan
Affiliation:Institute of Interdisciplinary Integrative Medicine Research, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine(TCM), Shanghai 201203, China,Institute of Interdisciplinary Integrative Medicine Research, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine(TCM), Shanghai 201203, China,Longhua Hospital Affiliated to Shanghai University of TCM, Shanghai 200032, China and Institute of Interdisciplinary Integrative Medicine Research, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine(TCM), Shanghai 201203, China
Abstract:
Keywords:Jinfukang oral liquid  non-small cell lung cancer  apoptosis  mitogen-activated protein kinases signaling pathway  Akt signaling pathway
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