RNF5介导JAMP泛素化促进内质网应激和细胞凋亡参与妊娠期糖尿病发展的机制研究

目的 探讨环指蛋白5(RNF5)通过介导JNK相关膜蛋白(JAMP)泛素化促进内质网应激和细胞凋亡，参与妊娠期糖尿病(GDM)疾病进展过程的机制。方法 采用免疫印迹法检测GDM胎盘组织标本中RNF5蛋白的表达水平，并分析其表达水平与内质网应激标志分子：X盒结合蛋白1(XBP-1)、磷酸化真核翻译起始因子2α(p-eIF2α)、真核翻译起始因子2α(eIF2α)、C/EBP同源蛋白(CHOP)表达水平的相关性。采用高糖环境培养BeWo细胞系建立体外GDM细胞模型，siRNA干扰RNF5表达后测定内质网应激标志(XBP-1、p-eIF2α/eIF2α、CHOP)水平的变化。采用CCK8法与流式细胞仪分别检测细胞活力、凋亡情况。采用体外泛素化实验来观察RNF5对JAMP泛素化的调控作用；采用链脲佐菌素注射的方法构建GDM小鼠模型，同时采用尾静脉注射siRNA-RNF5的方法来进行干预，干预4周后观察小鼠体重变化与胰岛素抵抗情况，并于4周后处死小鼠取胎盘组织，测定内质网应激标志分子水平。结果 RNF5蛋白质在GDM组胎盘组织中的表达水平显著高于对照组(P<0.05);内质网应激标志水平在...