抗卵巢癌相关抗原单克隆抗体的制备及免疫分析方法的建立

目的　研究从卵巢浆液性乳头状囊腺癌患者的腹腔积液中 ,纯化获得携带CA 12 5抗原决定簇的卵巢癌相关抗原。以此为免疫原 ,制备单克隆抗体 ,并建立放射免疫分析方法并应用于临床中。方法　腹腔积液经高氯酸分离 ,凝胶层析及亲和胶蓝柱层析纯化CA 12 5相关抗原。应用细胞融合技术 ,抗体采用ELISA方法、免疫印记技术进行鉴定。单克隆抗体经碘原法标记放射性核素1 2 5I ,初步建立 1种碘标固相双位点夹心模式的免疫放射分析法。结果　腹腔积液中CA12 5相关抗原经纯化 ,其比活度达 1.1× 10 6 U mg。共获得 6株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株 ,采用 2株配对最佳的抗体 ,初步建立 1种碘标免疫放射分析法。该方法可测下限为 1.2U ml ,批内变异系数为 4.4% ,批间变异系数为 9.6% ,平均回收率为 97.0 %。初步临床应用的结果表明在正常人血清中CA 12 5相关抗原平均值为 (2 .14 7± 3 .0 92 )U ml。在 60例卵巢癌患者中 ,平均值为 (10 6.5± 187.5 )U ml ,两者比较有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　以患者腹腔积液中纯化的CA12 5相关抗原制备单克隆抗体 ,并建立放射免疫分析方法 ,初步应用于临床血清学测定中 ,对卵巢癌的辅助诊断具有一定价值

Preparation of Monoclonal Antibodies Against Ovarian Associated Antigen and Establishment of Immunoradiometric Assay