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16S rRNA基因的PCR-DGGE技术分析逍遥散干预抑郁模型大鼠盲肠菌群的变化
引用本文:沈小丽,彭国茳,孙海峰,田俊生,秦雪梅.16S rRNA基因的PCR-DGGE技术分析逍遥散干预抑郁模型大鼠盲肠菌群的变化[J].山西医科大学学报,2015(3):240-245.
作者姓名:沈小丽  彭国茳  孙海峰  田俊生  秦雪梅
作者单位:山西大学中医药现代研究中心;山西大学化学化工学院
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81102833,81173366,81441096)
摘    要:目的观察和寻找慢性温和不可预知应激程序(CUMS)抑郁模型药物干预后的菌群变化并鉴定具体菌种。方法SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、盐酸氟西汀组和逍遥散组;采用慢性温和不可预知应激程序(CUMS)复制大鼠抑郁模型,在第1天时除空白组和模型组给予等体积生理盐水外,其他两组分别给予逍遥散和盐酸氟西汀,28 d后取盲肠;提取盲肠基因组DNA,并对16 S rRNA基因V3可变区进行PCR扩增,构建变性梯度凝胶电泳(DGGE)指纹图谱并制定碱基序列。将PCR扩增产物与大肠杆菌DH5α感受态细胞混合培养,选取形成的白色菌落,进行鉴定分析。结果体重和行为学指标显示CUMS复制成功;盲肠指数显示逍遥散可回调慢性应激对盲肠所产生的影响。采用BLAST程序对盲肠菌群DGGE指纹图谱及测得的序列进行相似性分析发现Lachnospiraceae bacterium、Lactobacillus animali、Burkholderiales bacterium、Lactobacillus reuteri四种优势菌。与空白对照组相比,Lachnospiraceae bacterium、Lactobacillus animali、Burkholderiales bacterium三种菌种的丰度在模型组均增强,Lactobacillus reuteri在模型组显著减弱。给予逍遥散后,Lactobacillus animali的丰度增强,Lachnospiraceae bacterium的丰度不变,而其他两种细菌未检测到。结论通过DGGE分析发现抑郁症大鼠的盲肠菌群发生明显改变,逍遥散通过调节抑郁症大鼠肠道菌群的益生菌来改善胃肠功能。

关 键 词:CUMS  盲肠菌群  PCR  DGGE  逍遥散

Changes of cecum flora of depressive rats after Xiaoyaosan intervention by PCR-DGGE and 16S rRNA gene library analysis
SHEN Xiaoli;PENG Guojiang;SUN Haifeng;TIAN Junsheng;QIN Xuemei.Changes of cecum flora of depressive rats after Xiaoyaosan intervention by PCR-DGGE and 16S rRNA gene library analysis[J].Journal of Shanxi Medical University,2015(3):240-245.
Authors:SHEN Xiaoli;PENG Guojiang;SUN Haifeng;TIAN Junsheng;QIN Xuemei
Institution:SHEN Xiaoli;PENG Guojiang;SUN Haifeng;TIAN Junsheng;QIN Xuemei;Modern Research Center for Traditional Chinese Medicine,Shanxi University;College of Chemistry and Chemical Engineering,Shanxi University;
Abstract:
Keywords:
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