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内质网应激相关蛋白1对衣霉素诱导HepG2细胞内质网应激的影响
引用本文:肖元元,韩峻峰,毛月芹,王倩倩,魏美林,殷峻,黄金伟,魏丽. 内质网应激相关蛋白1对衣霉素诱导HepG2细胞内质网应激的影响[J]. 中华诊断学电子杂志, 2014, 2(1): 32-37. DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-655X.2014.01.006
作者姓名:肖元元  韩峻峰  毛月芹  王倩倩  魏美林  殷峻  黄金伟  魏丽
作者单位:1. 200233 上海交通大学医学院附属第六人民医院内分泌代谢科 上海市糖尿病研究所2. 上海交通大学无锡研究院
基金项目:国家自然科学基金(81370956); 上海交通大学无锡研究院交大专项资金(2011JDZX021)
摘    要:目的研究过表达内质网应激相关蛋白1(SERP1)对衣霉素诱导肝癌HepG2细胞内质网应激的影响。 方法以衣霉素诱导HepG2细胞发生内质网应激,将细胞分为以下5组:正常对照组、衣霉素组、衣霉素+0.25μg SERP1转染组、衣霉素+0. 5μg SERP1转染组和衣霉素+1.0μg SERP1转染组,每组实验重复3次;采用MTT法检测不同浓度与作用时间的衣霉素对HepG2细胞存活率的影响,以吸光度(A)值表示。Western blot法检测各组细胞内内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)以及钙联蛋白的表达水平。采用SPSS 15.0统计软件进行统计学分析,比较蛋白表达水平。 结果与对照组相比,衣霉素处理组HepG2细胞中内质网应激标志性蛋白GRP78、CHOP及Calnexin蛋白表达量显著升高,分别为对照处理组的3.8倍(t=11.5,P<0.05)、1.3倍(t=3.498,P<0.05)和1.4倍(t=4.1,P<0.05),差异均有统计学意义;随着SERP1过表达量的逐渐升高,变化呈现剂量依赖性。随着SERP1转染剂量的增加,各组GRP78蛋白的表达较单独衣霉素处理组分别下降了12%[(1.83±0.29)A值,(1.61±0.13)A值,t=2.36,P>0.05]、24%和30%[(1.83±0.29)A值,(1.40±0.11)A值,(1.27±0.21)A值;F=50.56,P<0.05],CHOP蛋白的表达水平分别下降了23%, 29%和34%[(1.0±0.15)A值,(0.79±0.07)A值,(0.72±0.55)A值,(0.67±0.14)A值;F=9.532,P<0.05],Calnexin蛋白的表达水平分别下降了5%[(1.20±0.18)A值,(1.15±0.13)A值;P>0.05]、24%和28%[(1.20±0.18)A值,(0.92±0.07)A值,(0.87±0.18)A值;F=8.116,P<0.05]。 结论外源性过表达SERP1蛋白通过下调内质网应激蛋白的表达,降低HepG2细胞内质网应激水平,缓解内质网应激介导的细胞损伤。

关 键 词:内质网应激  内质网应激相关蛋白1  葡萄糖调节蛋白78  C/EBP同源蛋白  钙联蛋白  
收稿时间:2013-10-27

Effects of stress-associated endoplasmic reticulum protein 1 on endoplasmic stress induced by the tunicamycin in HepG2 cells
Yuanyuan Xiao,Yueqin Mao,Qianqian Wang,Meilin Wei,Junfeng Han,jun Yin,Jinwei Huang,Li Wei. Effects of stress-associated endoplasmic reticulum protein 1 on endoplasmic stress induced by the tunicamycin in HepG2 cells[J]. Chinese Journal of Diagnostics (Electronic Edition), 2014, 2(1): 32-37. DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-655X.2014.01.006
Authors:Yuanyuan Xiao  Yueqin Mao  Qianqian Wang  Meilin Wei  Junfeng Han  jun Yin  Jinwei Huang  Li Wei
Affiliation:1. Department of Endocrinology and Metabolism, Shanghai Jiaotong University Affiliated Sixth People′s Hospital, Shanghai 200233, China
Abstract:
Keywords:Endopasmic reticulum stress  Stress-associated Endoplasmic Reticulum Protein 1  Glucose-regulated protein 78  C/EBP homologous protein  Calnexin  
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