ALKBH5调控大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的作用研究 |
| |
引用本文: | 周洋,涂彬,宋凯,王娟,孙赫,孙峰,沙纪名,李锐,张野,陶辉.ALKBH5调控大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的作用研究[J].安徽医科大学学报,2022(12):1870-1874. |
| |
作者姓名: | 周洋 涂彬 宋凯 王娟 孙赫 孙峰 沙纪名 李锐 张野 陶辉 |
| |
作者单位: | 1. 安徽医科大学第二附属医院心胸外科;2. 安徽医科大学药学院;3. 安徽医科大学第二附属医院麻醉科 |
| |
基金项目: | 国家自然科学基金(编号:82170236);;安徽省重点研究与开发计划项目(编号:202104j07020037);;安徽省教育厅高校科学研究项目(编号:YJS20210312); |
| |
摘 要: | 目的 探讨6-甲基腺嘌呤(m6A)去甲基化酶ALKBH5在大鼠心肌成纤维细胞(CFs)活化增殖中的作用。方法 取1~3 d新生SD乳鼠心脏,剪碎消化后进行CFs原代培养,并在显微镜下观察细胞形态。细胞贴壁生长后加入TGF-β1诱导构建CFs活化增殖模型,模型构建成功后分别向各组细胞转染ALKBH5(慢病毒过表达ALKBH5)及慢病毒空载体24~48 h。运用RT-qPCR方法检测ALKBH5、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原(CollagenⅠ)和增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA的表达;Western blot检测ALKBH5、α-SMA、CollagenⅠ及PCNA蛋白的表达;CCK-8法和EdU染色检测细胞增殖活性变化。结果 在CFs活化增殖模型中,与对照组CFs相比,模型组CFs中ALKBH5蛋白和mRNA的表达降低,而与活化增殖相关蛋白PCNA、α-SMA及CollagenⅠ的表达增加。此外,在慢病毒转染ALKBH5过表达组的CFs中,α-SMA、CollagenⅠ和PCNA蛋白和mRNA同ALKBH5病毒空载体组相比表达下降。CCK-8与Ed...
|
关 键 词: | ALKBH5 心肌成纤维细胞 心肌纤维化 活化 增殖 |
|