Smac蛋白干扰胰腺癌Bx-PC3细胞系survivin蛋白增敏顺铂化疗

目的: 观察Smac蛋白对细胞凋亡抑制蛋白survivin的下调作用, 进一步分析Smac蛋白转染增敏survivin过表达胰腺癌Bx-PC3细胞系顺铂化疗敏感性的效应.方法: 建立稳定传代、均一表达survivin的Bx-PC3细胞系.制备Smac-GFP重组质粒, 将其转染入Bx-PC3细胞, 以Western blot法半定量测定survivin表达水平.联合10 mg/L顺铂孵育48 h和72 h, 按照MTT法测定细胞抑制率(%).结果: Bx-PC3细胞转染24 h开始出现微弱阳性转染表现(GFP绿色荧光阳性), 于48 h出现大量细胞转染, 于72 h转染水平达到峰值.Western blot检测表明, 与对照组相比, 转染组的survivin蛋白表达水平仅为对照组的28.6%(P<0.01).MTT检测发现, 随着顺铂作用时间的延长, 对照组和转染组的顺铂抑制率均升高(48 h vs 72 h, P<0.05).而且, 转染组的抑制率在两时点上均高于对照组(P<0.01).结论: Survivin蛋白在胰腺癌中具有重要的增殖调控作用, 并且与胰腺癌化疗抵抗密切相关.Smac蛋白拮抗可以在蛋白水平上下调survivin的表达, 提高胰腺癌细胞对化疗的敏感性, 这一治疗策略有望成为一种治疗胰腺癌的新型有效治疗方法.

Interference of survivin in pancreatic cancer Bx-PC3 cell line with Smac sensitizing its response to cisplatin