不同方式负载AFP抗原的DC诱导抗肝癌HepG2细胞免疫效应的比较

目的：比较AFP抗原以不同方式负载DCs对后者生物学功能的影响及体外刺激CTL对肝癌HepG2细胞的杀伤作用。方法：分离健康供者外周血单个核细胞培养DC，分别用（A）人工合成AFP抗原肽、（B）HepG2细胞裂解物、（C）HepG2细胞分泌的外泌体（tumor exosome, T-exo）、（D）AFP抗原的重组腺相关病毒（recombinant adeno-associated virus expressing α-fetoprotein antigen, rAAV/AFP）致敏DC前体细胞及（E）未负载抗原的DC作为对照，经GM-CSF、IL-4及LPS联合诱导DCs分化成熟。流式细胞术检测rAAV/AFP病毒感染效率、各组DCs表型及其剌激初始T细胞的增殖效应，7-ADD/CFSE双染法流式细胞术检测各组DCs诱导CTL对AFP阳性HepG2细胞的杀伤作用。结果：几种抗原负载方式均可诱导DCs成熟、促进CTL增殖及特异性识别并杀伤HepG2细胞，但rAAV/AFP感染DCs后，其CD83、CD86、ICAM-1、CD58、CD40分子表达水平明显高于对照组（P<0.05），rAAV/AFP+DC组和HepG2-Texo+DC组对HepG2细胞的杀伤作用均分别显著优于其他抗原负载（AFP/peptide+DC、HepG2 lysate+DC）组[（44.92±4.12）% vs（28.42±3.29）%、（24.28±1.79)%;（41.40±2.87）% vs （28.42±3.29）%、（24.28±1.79）%；均P<0.05）]。结论：rAAV/AFP高效感染DCs后能有效刺激初始T细胞增殖，并增强CTL对AFP阳性靶细胞的杀伤活性，而负载Texo的DCs也能诱导显著的抗肝癌效应，上述结果为基于DCs的肝癌疫苗的研发提供新的思路。

Comparison of cotytoxic effects against liver cancer HepG2 cells by DCs loaded with AFP antigen in different ways