| 影响人α-突触核蛋白基因在原核细胞中表达因素的研究 |
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| 引用本文： | 李淑婷,陈彪. 影响人α-突触核蛋白基因在原核细胞中表达因素的研究[J]. 解剖学报, 2002, 33(5): 492-495 |
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| 作者姓名： | 李淑婷 陈彪 |
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| 作者单位： | 首都医科大学宣武医院神经内科实验室,北京老年医学研究所,北京,100053 |
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| 基金项目： | 国家科技部 973项目资助 (G2 0 0 0 0 5 70 0 5 ) |
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| 摘 要： | 目的 研究影响人α 突触核蛋白 (α synuclein)基因在原核细胞中表达的常见因素 ,以提高其在原核细胞中的表达量。 方法 将重组质粒ProEXNACP转化进入到DH5α 大肠杆菌体内 ,观察诱导剂IPTG浓度、诱导时间、诱导温度、诱导培养基、诱导初始菌浓度及诱导中pH值变化等因素对蛋白表达产量的影响 ,用SDS PAGE梯度胶电泳分析 ,考马斯亮蓝染色进行比较研究 ,同时检测pH值 ,观察其变化。 结果 诱导剂IPTG浓度对诱导蛋白产生的影响不大 ,诱导过程中pH值变化较小 ,而诱导时间、温度、初始菌浓度和培养基的种类对诱导产生α 突触核蛋白有较大影响。其中 ,以LB培养基 ,37℃ ,180r min诱导 1～ 2h产生α 突触核蛋白的量最大。 结论 诱导剂IPTG诱导ProEXNACP/DH5α大肠杆菌产生α 突触核蛋白的量与诱导时间、温度、初始菌浓度和培养基的种类有明显的关系。初始菌A590 =0 5～ 0 8,LB培养基 ,37℃ ,大通氧量 (180r min以上 ) ,1～ 2h诱导可作为大量提取、纯化α 突触核蛋白的首选条件。
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| 关 键 词： | α突触核蛋白 诱导 DH5α大肠杆菌 蛋白表达 |
FACTORS ASSOCIATED WITH THE EXPRESSION OF HUMAN α-SYNUCLEIN GENE IN PROKARYOTIC CELLS |
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