| 靶向Id-1基因的RNA干扰对人矽肺癌细胞增殖的影响 |
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| 引用本文： | 杨超,蔡哲,石超,裴斐,杨春蕾. 靶向Id-1基因的RNA干扰对人矽肺癌细胞增殖的影响[J]. 兰州大学学报(医学版), 2011, 37(2): 10-14,19 |
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| 作者姓名： | 杨超 蔡哲 石超 裴斐 杨春蕾 |
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| 作者单位： | 四川大学生命科学学院,四川成都,610041 |
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| 基金项目： | 四川省科技厅公益性项目 |
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| 摘 要： | 目的探讨RNA干扰技术沉默Id-1基因表达后对矽肺癌细胞株增殖能力的影响。方法针对Id-1基因mRNA靶向设计合成短发夹RNA,构建重组pGFU6/neo质粒,重组质粒转染矽肺癌YTLMC-90细胞株。反转录-聚合酶链式反应检测转染后Id-1基因的转录;免疫印迹法检测Id-1,核转录因子NF-κB/p50、NF-κB/p65,Bcl-2,Bax,环氧合酶-2,c-Myc基因,血管内皮细胞生长因子,增殖细胞核抗原,β-actin基因的表达;流式细胞术检测细胞周期的变化;~3H-胸腺嘧啶核苷掺入法、四氮唑蓝法和克隆形成实验检测细胞的增殖活力。结果重组质粒经酶切和测序鉴定,证明靶基因序列正确,质粒构建成功;反转录-聚合酶链式反应和免疫印迹法检测结果表明,矽肺癌细胞转染重组质粒后Id-1基因mRNA转录和蛋白合成都明显下降,Bcl-2、环氧合酶-2、c-Myc、增殖细胞核抗原、血管内皮细胞生长因子等与增殖相关基因表达量下降;细胞周期被阻滞在G_0/G_1期,S期细胞明显减少;细胞活力降低,增殖受到抑制。结论构建的重组质粒能靶向沉默Id-1基因,并抑制YTLMC-90细胞株的增殖能力,因此Id-1基因可以作为人矽沉着病并发肺癌基因治疗的候选靶点。
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| 关 键 词： | Id-1基因 RNA干扰 矽沉着病 肺癌 增殖 |
Id-1-targeted RNA interference regulation of cell proliferation in human lung cancer cell line in vitro |
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| YANG Chao,CAI Zhe,SHI Chao,PEI Fei,YANG Chun-lei. Id-1-targeted RNA interference regulation of cell proliferation in human lung cancer cell line in vitro[J]. Journal of Lanzhou University (Medical Sciences), 2011, 37(2): 10-14,19 |
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| Authors: | YANG Chao CAI Zhe SHI Chao PEI Fei YANG Chun-lei |
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| Affiliation: | Yang Chao,Cai Zhe,Shi Chao,Pei Fei,Yang Chun-lei (College of Life Science,Sichuan University,Chengdu 610041,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Id-1 gene RNA interference silicosis lung cancer proliferation |
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