| 抗炭疽毒素保护性抗原单克隆抗体的制备及功能分析 |
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| 引用本文： | 吕洪臻,唐小军,熊四平,徐 鑫,郑 峰,冯振卿,朱 进.抗炭疽毒素保护性抗原单克隆抗体的制备及功能分析[J].南京医科大学学报,2013(11):1497-1501. |
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| 作者姓名： | 吕洪臻 唐小军 熊四平 徐 鑫 郑 峰 冯振卿 朱 进 |
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| 作者单位： | 南京医科大学病理学系,江苏 南京 210029;南京医科大学病理学系,江苏 南京 210029;南京医科大学病理学系,江苏 南京 210029;南京医科大学病理学系,江苏 南京 210029;南京军区军事医学研究所,江苏 南京 210002;南京医科大学病理学系,江苏 南京 210029;南京医科大学病理学系,江苏 南京 210029;南京军区军事医学研究所,江苏 南京 210002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31170884);江苏省自然科学基金(BK2012527) |
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| 摘 要： | 目的:原核表达炭疽杆菌保护性抗原PA10蛋白,制备单克隆抗体,并进行功能分析?方法:人工合成炭疽杆菌保护性抗原PA10编码基因并克隆入pUC57载体,酶切鉴定后,将PA10编码基因插入原核表达载体pColdⅡ中,测序验证正确后转化至大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG和低温条件下诱导蛋白表达,SDS-PAGE验证产物;用HiTrap IMAC HP柱纯化重组蛋白,Western blot进一步验证?以纯化获得PA10重组蛋白为抗原,常规程序免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,并检测所制备抗体的中和活性?结果:获得的PA10重组蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体,最终获得了4株特异性的单克隆抗体(分别命名为2G8?5A8?7B3? 9C9)?经体外炭疽毒素保护试验证实,其中1株单抗(7B3)具有较强的中和活性,其保护率可高达96%?结论:本文成功构建并表达炭疽杆菌保护性抗原PA10,制备了具有中和活性的抗PA单克隆抗体,为构建人源化的抗PA中和抗体奠定基础,从而有望用于炭疽病的治疗?
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| 关 键 词： | 炭疽杆菌 保护性抗原 单克隆抗体 中和抗体 |
| 收稿时间： | 6/3/2013 12:00:00 AM |
Preparation and function identification of monoclonal antibodies against anthrax protective antigen |
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| Lv Hongzhen,Tang Xiaojun,Xiong Siping,Xu Xin,Zheng Feng,Feng Zhenqing and Zhu Jin.Preparation and function identification of monoclonal antibodies against anthrax protective antigen[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2013(11):1497-1501. |
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| Authors: | Lv Hongzhen Tang Xiaojun Xiong Siping Xu Xin Zheng Feng Feng Zhenqing and Zhu Jin |
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| Institution: | Department of Pathology,NJMU,Nanjing 210029;Department of Pathology,NJMU,Nanjing 210029;Department of Pathology,NJMU,Nanjing 210029;Department of Pathology,NJMU,Nanjing 210029;Huadong Medical Institute of Biotechniques,Nanjing 210002,China;Department of Pathology,NJMU,Nanjing 210029;Department of Pathology,NJMU,Nanjing 210029;Huadong Medical Institute of Biotechniques,Nanjing 210002,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bacillus anthracis protective antigen monoclonal antibody neutralizing antibody |
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