| 起始Met对增强型绿色荧光蛋白功能的影响 |
| |
| 引用本文： | 肖利佳,王丹,李昌龙,翟芬. 起始Met对增强型绿色荧光蛋白功能的影响[J]. 西部医学, 2010, 22(3): 412-414,417 |
| |
| 作者姓名： | 肖利佳 王丹 李昌龙 翟芬 |
| |
| 作者单位： | 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室,四川,成都,610041 |
| |
| 基金项目： | 教育部回国人员科研启动基金项目 |
| |
| 摘 要： | 目的以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）中起始Met为例，初步探索组成EGFP的不同氨基酸对EGFP发光功能的影响，为绿色荧光蛋白的变体改造提供理论基础。方法运用分子生物学技术去掉质粒pEGFP—N1中编码EGFP的起始氨基酸Met的密码子，将beta—actin的上游的435bp序列引入突变型EGFP阅读框的上游，将此融合型质粒转染A549细胞后，运用一系列检测方法检测融合蛋白的表达水平及转染细胞的的发光强度。结果突变掉起始Met后，EGFP丧失了发光功能。结论起始Met对保持EGFP的发光功能有重要作用，提示Met作为绝大多数蛋白质的生物合成起始氨基酸，可能是维持某些蛋白质的正确的空间结构所必须的氨基酸。
|
| 关 键 词： | 增强型绿色荧光蛋白 起始甲硫氨酸 结构 功能 |
The role of initiating Met in the fluorescent function of enhanced green fluorescent protein |
| |
| XIAO Li-jia,WANG Dan,ZHAI Fen,et al. The role of initiating Met in the fluorescent function of enhanced green fluorescent protein[J]. , 2010, 22(3): 412-414,417 |
| |
| Authors: | XIAO Li-jia WANG Dan ZHAI Fen et al |
| |
| Affiliation: | XIAO Li-jia,WANG Dan,ZHAI Fen,et al (Department of Biochemistry , Molecular Biology,West China School of Preclinical , Forensic Medicine,Sichuan University,Chengdu 610041,China) |
| |
| Abstract: | Objective GFP and related variants have been widely utilized as the most important fluorescent tracers in the fusion-protein research.Our investigation was to explore the effect of initiating Met on the fluorescence of EGFP.Methods The initiating ATG of the coding sequence for EGFP in pEGFP-N1 was deleted through molecular biological techniques,and the 435bp fragment of the 5'end of human beta-actin cDNA was ligated to the upstream of the mutated EGFP in pEGFP-N1,then the recombinant plasmid was transfected... |
| |
| Keywords: | EGFP Initiating Met Structure Function |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
