| 聚合酶链反应扩增人动脉粥样硬化抗体全套可变区基因 |
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| 引用本文： | 于秀艳,张皓,孙敏莉,张柏根. 聚合酶链反应扩增人动脉粥样硬化抗体全套可变区基因[J]. 上海交通大学学报(医学版), 2006, 26(11): 1260-1263 |
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| 作者姓名： | 于秀艳 张皓 孙敏莉 张柏根 |
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| 作者单位： | 上海交通大学医学院仁济医院血管外科 上海200001 |
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| 基金项目： | 上海市卫生局基金(024079)资助项目 |
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| 摘 要： | 目的利用二次聚合酶链反应(PCR)扩增人动脉粥样硬化抗体全套可变区基因,并将其克隆到T载体进行测序验证。方法收集50例动脉粥样硬化患者外周动脉血标本,密度梯度离心法分离淋巴细胞,TR Izol法提取总RNA,用逆转录-PCR扩增轻链可变区基因(包括VK和Vλ)和重链可变区基因(VH),分别酶切后克隆到T载体上,随机挑取2个克隆进行测序验证。结果总RNA的纯度和完整性都较好,经过2次PCR成功扩增出了抗体全套轻、重链可变区基因。测序结果与已有的人抗体基因的序列高度同源。结论该方法成功扩增出了人动脉粥样硬化抗体全套可变区基因,为下一步噬菌体单链抗体库的构建和筛选奠定了基础。
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| 关 键 词： | 聚合酶链反应 抗体可变区基因 T载体 |
| 文章编号： | 0258-5898(2006)11-1260-04 |
| 收稿时间： | 2006-09-11 |
| 修稿时间： | 2006-09-11 |
Amplification of All Immunoglobulin V Genes of Human Atherosclerosis by Polymerase Chain Reaction |
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| YU Xiu-yan,ZHANG Hao,SUN Min-li,ZHANG Bai-gen. Amplification of All Immunoglobulin V Genes of Human Atherosclerosis by Polymerase Chain Reaction[J]. Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science, 2006, 26(11): 1260-1263 |
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| Authors: | YU Xiu-yan ZHANG Hao SUN Min-li ZHANG Bai-gen |
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| Affiliation: | Department of Vascular Surgery, Renji Hospital, School of Medicine, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200001, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | polymerase chain reaction antibody V gene T-vector |
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