| 人肝癌胰岛素样生长因子Ⅱ基因P2,P4启动子克隆及序列分析 |
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| 作者姓名： | 汤绍辉 杨冬华 黄卫 舒建昌 |
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| 作者单位： | 暨南大学附属第一医院消化科,广州,510630;暨南大学附属第一医院消化科,广州,510630;暨南大学附属第一医院消化科,广州,510630;暨南大学附属第一医院消化科,广州,510630 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(编号:30070853)，广东省自然科学基金资助项目(编号:990422) |
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| 摘 要： | 目的克隆人胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P2,P4启动子并进行序列分析,以明确肝癌组织中IGF-Ⅱ启动子碱基序列有无改变及其与转录调控的关系,为后续研究奠定基础。方法根据GenBank数据库提供的IGF-Ⅱ基因全序列及有关文献,应用巢式PCR扩增L-02人胎肝细胞系(正常对照)及8例肝癌组织的IGF-ⅡP2,P4启动子,并采用TOPO TA Cloning kit将PCR产物克隆入pCR2.1-TOPO T载体。目的DNA片段和阳性重组子分别通过琼脂糖凝胶电泳及直接测序鉴定。结果①L-02细胞及8例肝癌组织P2,P4启动子均扩增成功,长度分别为684 bp及1 246 bp;②8例肝癌组织P2,P4启动子碱基序列与L-02相应的DNA序列完全相同,未见突变、缺失等改变,经与GenBank数据库比较,结果完全一致。结论①成功克隆了IGF-ⅡP2,P4启动子;②本组肝癌组织中IGF-ⅡP2,P4启动子序列稳定,未见突变、缺失等改变,可能与IGF-Ⅱ异常表达的转录调控机制无关。
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| 关 键 词： | 肝细胞癌 胰岛素样生长因子Ⅱ 启动子 克隆 |
| 收稿时间： | 2005-07-20 |
| 修稿时间： | 2005-07-20 |
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