| 四环素基因表达调控系统介导的HBV X基因体外表达细胞株的建立 |
| |
| 引用本文： | 唐红,林勇,秦山,赵连三. 四环素基因表达调控系统介导的HBV X基因体外表达细胞株的建立[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2002, 22(2): 194-197 |
| |
| 作者姓名： | 唐红 林勇 秦山 赵连三 |
| |
| 作者单位： | 610046,成都,四川大学华西医院,四川省感染病分子生物学重点实验室 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(38970047);CMB基金资助项目 |
| |
| 摘 要： | 目的：建立稳定，高效的HBxAg体外表达的细胞株，以便进一步研究HBV X基因和HBxAg的致癌作用及机理，方法：构建带有完整四环素基因关闭（Tet-off)系统的HBV X基因重组表达质粒pBPSTR1-FlagX，用该重组质粒转染NIH 3T3细胞，筛选嘌呤霉素抗性细胞克隆，用抗－FlagM2单抗和兔抗－HBx作蛋白质免疫印迹分析，检测细胞内Flag-HBxAg表达和四环素调控其表达的情况。结果：重组质粒pBPSTR1-FlagX转染NIH 3T3细胞后获得30个生长良好的嘌呤霉素抗性细胞克隆。其中12个细胞克隆有Flag-HBxAg的稳定表达，且有5个克隆的Flag-HBxAg表达受四环素调控，当四环素浓度逐渐增高时，细胞内Flag-HBxAg的表达逐渐减弱。四环素浓度达1μg/ml时，Flag-HBxAg表达被完全抑制。结论：本研究成功构建了四环素调控系统介导的HBV X基因体外表达细胞株，该细胞株不仅能稳定高水平地表达HBxAg，而且具有定时“开”“关”和定量调节HBxAg表达水平的特性，是HBVX基因功能研究的一个有用工具。
|
| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 X基因 细胞株 基因表达调控 四环素 重组质粒 |
| 修稿时间： | 2001-03-19 |
Establishment of an in vitro cell line with HBV X gene expression which is mediated by tetracycline-regulated gene expression system |
| |
| TANG Hong,LIN Yong,QIN Shan,ZHAO Liansan. Key Laboratory of Molecular Biology for Infectious Diseases of Sichuan Province,West China University Hospital,Sichuan University,Chengdu ,P. R. China. Establishment of an in vitro cell line with HBV X gene expression which is mediated by tetracycline-regulated gene expression system[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 2002, 22(2): 194-197 |
| |
| Authors: | TANG Hong LIN Yong QIN Shan ZHAO Liansan. Key Laboratory of Molecular Biology for Infectious Diseases of Sichuan Province West China University Hospital Sichuan University Chengdu P. R. China |
| |
| Affiliation: | TANG Hong,LIN Yong,QIN Shan,ZHAO Liansan. Key Laboratory of Molecular Biology for Infectious Diseases of Sichuan Province,West China University Hospital,Sichuan University,Chengdu 610041,P. R. China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Hepatitis B virus X gene Cell line Regulation of gene expression Tetracycline |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
