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一种重组腺病毒载体的扩增、纯化和病毒滴度检测方法
引用本文:李培建,李兵仓.一种重组腺病毒载体的扩增、纯化和病毒滴度检测方法[J].中华神经医学杂志,2002,1(1):52-55.
作者姓名:李培建  李兵仓
作者单位:1. 北京军区总医院神经外科,北京,100700
2. 第三军医大学大坪医院野战外科研究所,重庆,400042
基金项目:国家重点基础研究发展规划项目(973项目)资助(G1 999054206)
摘    要:目的建立扩增、纯化和生物活性鉴定重组腺病毒AxCA-BDNF的有效方法,为进一步研究应用腺病毒介导的BDNF进行神经系统疾病的基因治疗奠定基础。方法应用人胚肾293细胞作为包装细胞,扩增携带BDNF cDNA表达片段的重组腺病毒载体AxCA-BDNF;利用改良的CsCl超速离心法对其进行纯化;应用病毒空斑试验,对纯化病毒液进行病毒生物活性测定。结果获得了50 μl纯化病毒液;病毒滴度达2.2×108~1.8×1010 pfu/ml。结论通过培养扩增293细胞,可成功扩增重组腺病毒AxCA-BDNF;纯化病毒液量可完全满足体内基因转染实验的需要;病毒空斑实验证明其具有高强度的生物活性。

关 键 词:重组腺病毒  载体扩增  载体纯化
文章编号:1671-8925(2002)01-052-04
修稿时间:2002年9月2日

Reproduction, purification and biological activity identification of AxCA-BDNF
LI Peijian ,LI Bingcang.Reproduction, purification and biological activity identification of AxCA-BDNF[J].Chinese Journal of Neuromedicine,2002,1(1):52-55.
Authors:LI Peijian  LI Bingcang
Institution:LI Peijian 1,LI Bingcang 2 1 Department of Neurosurgery,General Hospital of Beijing Command,Beijing 100700,China, 2 Research Institute of Field Surgery,Third Military Medical University,Chongqing 400042,China
Abstract:
Keywords:recombinant adenovirus  vector reproduction  vector purification  
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