Ag85B DNA/H37Ra序贯免疫效果的探讨

目的:初步探讨含结核分枝杆菌Ag85B成熟蛋白的DNA（pTB30m）和结核菌H37Ra序贯免疫小鼠产生的特异性免疫应答。方法:重组质粒pTB30m用碱裂解法制备后进行质量鉴定。用pTB30m肌注初次免疫小鼠2周后,H37Ra皮内加强免疫作为DNA-85B/H37Ra组,同时设定DNA-85B/BCG组、H37Ra组、BCG组及未免疫组。免疫4周或8周后,用ELISA法检测小鼠血清中抗PPDIgG抗体的水平和MTT法检测其脾淋巴细胞的刺激指数（SI）。结果:酶切鉴定pTB30m所含外源基因片段大小正确,并且纯度较高。DNA-85B/H37Ra组小鼠血清中抗PPDIgG水平、脾淋巴细胞的SI均显著高于未免疫组（P<0.05）;其抗PPDIgG水平稍高于DNA-85B/BCG组、H37Ra组及BCG组,但它们之间无显著性差异（P>0.05）;其脾淋巴细胞的SI显著高于H37Ra、BCG组（P<0.05）,而与DNA-85B/BCG组比较,仅在4周有显著性差异。在DNA-85B/H37Ra组内,SI在4周显著高于8周（P<0.05）,而血清中抗PPDIgG水平8周均显著高于4周（P<0.05）。结论:DNA-85B/H37Ra序贯免疫策略可以诱导小鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫,初步证明其免疫效果略优于BCG。