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沉默减数分裂内切酶1(EME1)抑制肝癌细胞增殖的机制
作者姓名:陈椿  王可欣  贺梦雯  李乐  王春艳  刘妍  纪冬
作者单位:1. 南方医科大学第二临床医学院;2. 解放军总医院第五医学中心肝病医学部;3. 安徽医科大学解放军三〇七临床医学院;4. 北京大学三〇二临床医学院;5. 解放军总医院第五医学中心感染病医学部
基金项目:北京市自然科学基金面上项目(7222173)~~;
摘    要:目的 探讨减数分裂内切酶1(EME1)在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞生物学行为的影响。方法 筛选TCGA数据库肝癌样本中的差异表达基因。采用免疫组化和Western Blot分析EME1在肝癌组织中的表达丰度。通过短发夹RNA(shRNA)构建慢病毒并感染BEL-7404细胞干扰EME1基因表达,分为沉默组(shEME1)和对照组(shCtrl)。通过实时荧光定量PCR法和Western Blot检测两组EME1 mRNA和蛋白表达水平,Celigo计数法及MTT活性检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞周期,Caspase3/7活性检测细胞凋亡。两组间比较采用成组t检验。结果 TCGA结果显示EME1的mRNA表达水平在肝癌组织中是癌旁组织的18.9倍(114.5±153.0 vs 8.0±7.2,t=5.00,P<0.001);EME1的蛋白表达水平在肝癌组织中是癌旁组织的7.0倍(免疫组化检测,8.4±2.6 vs 1.2±0.4,t=7.55,P<0.001)和2.5倍(Western Blot检测,249.0%±35.5%vs100.0%±77.8%,t=3.02,...

关 键 词:癌,肝细胞  减数分裂内切酶1  RNA,小分子干扰  细胞增殖
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