酰基甘油激酶通过影响PTEN/PI3K/Akt/Gsk3β信号通路调控血小板活化 |
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作者姓名: | 张鹏 毕昌龙 魏萌 姜哲轶 张田田 张俊峰 |
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作者单位: | 上海交通大学医学院附属第九人民医院心血管内科 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81670316,81970289); |
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摘 要: | 目的:探究酰基甘油激酶(AGK)在血小板活化中的作用及可能的调控机制。方法:分别提取野生型小鼠(WT)和AgkG126E点突变(AGK激酶活性丧失)小鼠(PM)的血小板。将等体积、等浓度的WT或PM小鼠的血小板放入聚集仪,分别利用3种刺激剂(α-Thrombin、ADP、U46619)刺激,检测每种刺激剂作用下相应的血小板聚集水平;每管聚集曲线达到最大稳定值后,加入等体积的ATP荧光检测剂,检测相应血小板活化过程中释放的ATP水平。分别在静息态WT或PM小鼠血小板(不加α-Thrombin刺激)、活化态WT或PM小鼠血小板(加入α-Thrombin刺激)中加入等量荧光偶联的纤维蛋白原(Fg),利用流式细胞仪检测血小板的Fg结合水平。Western blot法分别检测静息态(不加刺激剂)和活化态(加入α-Thrombin、ADP、U46619刺激)WT或PM小鼠血小板中关键信号通路蛋白的磷酸化水平。结果:在刺激剂作用于血小板后,PM小鼠血小板的聚集程度、ATP释放水平及Fg结合能力均明显低于WT小鼠的血小板(P均<0.01)。与WT小鼠相比,PM小鼠的血小板在活化过程中张力蛋白同源...
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关 键 词: | 酰基甘油激酶 血小板活化 张力蛋白同源性磷酸酶 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B 糖原合成激酶3β |
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