| 重组腺相关病毒Ⅰ型/大鼠肿瘤坏死因子受体:Fc(rAAVⅠ/ratTNFR:Fc)的构建和在大鼠体内表达的初步研究 |
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| 引用本文： | 高凯,赵爱志,吴小兵,药力波,张英起,王军志.重组腺相关病毒Ⅰ型/大鼠肿瘤坏死因子受体:Fc(rAAVⅠ/ratTNFR:Fc)的构建和在大鼠体内表达的初步研究[J].苏州大学学报(自然科学版),2005,25(2):182-185,219. |
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| 作者姓名： | 高凯 赵爱志 吴小兵 药力波 张英起 王军志 |
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| 作者单位： | [1]中国人民解放军第四军医大学研究生院，陕西西安730000 [2]国家863计划生物领域病毒基因载体研发基地，北京100176 [3]中国人民解放军第四军医大学研究生院，陕西西安730000／／中国药品生物制品检定所，北京100050 |
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| 基金项目： | 国家 8 63高技术研究发展计划资助项目 (2 0 0 3AA2Z3 480 ,2 0 0 4AA2 170 40 ) |
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| 摘 要： | 目的构建携带大鼠肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和大鼠免疫球蛋白IgG1 Fc段融合基因的重组Ⅰ型腺相关病毒(rAAVⅠ/ratTNFR:Fc),并对该病毒在Lewis大鼠体内的表达和生物学活性进行初步研究,探讨以该重组腺相关病毒载体应用于类风湿关节炎基因治疗的可行性.方法首先以RT-PCR分别从大鼠脾细胞和大鼠淋巴细胞总RNA中扩增出大鼠肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和大鼠免疫球蛋白IgG1 Fc段基因,并以重叠延伸PCR的方法将二者融合后克隆入pSNAVⅠ载体质粒进行重组病毒生产.在获得重组病毒后于Lewis大鼠肌肉注射,于不同时间ELISA测定血清ratTNFR:Fc表达,并以TNF-α细胞毒中和实验测定重组病毒表达产物的生物学活性.结果所构建的重组病毒rAAVⅠ/ratTNFR:Fc基因结构与预期一致;病毒于Lewis大鼠肌肉注射后可表达ratTNFR:Fc蛋白,含有ratTNFR:Fc蛋白的血清可以有效中和大鼠TNF-α对L929细胞的杀伤作用.结论本研究所构建的携带大鼠肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和大鼠免疫球蛋白IgG1 Fc段融合基因的重组Ⅰ型腺相关病毒(rAAVⅠ/ratTNFR:Fc)可以用来作为阻断TNF-α的手段于大鼠类风湿关节炎模型上进行基因治疗研究.
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| 关 键 词： | 腺相关病毒 基因治疗 肿瘤坏死因子 类风湿关节炎 |
| 文章编号： | 1673-0399(2005)02-0182-04 |
Construction and in vivo Expression of Recombinant Adeno-associated Virus Type-Ⅰ in Rats Vector Encoding Rat Tumor Necrosis Factor Receptor: Fc Fusion Gene (rAAVⅠ/ratTNFR:Fc |
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| GAO Kai,ZHAO Ai-zhi,WU Xiao-bing,et al.Construction and in vivo Expression of Recombinant Adeno-associated Virus Type-Ⅰ in Rats Vector Encoding Rat Tumor Necrosis Factor Receptor: Fc Fusion Gene (rAAVⅠ/ratTNFR:Fc[J].Suzhou University Journal of Medical Science,2005,25(2):182-185,219. |
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| Authors: | GAO Kai ZHAO Ai-zhi WU Xiao-bing |
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| Institution: | GAO Kai1,ZHAO Ai-zhi2,WU Xiao-bing2,et al |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | adeno-associated virus gene therapy tumor necrosis factor rheumatoid arthritis |
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