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| 肺组织特异性基因HIMF的克隆及其真核表达载体的构建 | |
| 引用本文： | 郑丽端,童强松,蔡嘉斌,蒋国松,刘媛,董继华.肺组织特异性基因HIMF的克隆及其真核表达载体的构建[J].华中科技大学学报(医学版),2008,37(4). |
| 作者姓名： | 郑丽端 童强松 蔡嘉斌 蒋国松 刘媛 董继华 |
| 作者单位： | 1. 华中科技大学同济医学院附属协和医院病理科,武汉,430022 2. 华中科技大学同济医学院附属协和医院小儿外科,武汉,430022 3. 华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室,武汉,430022 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，教育部跨世纪优秀人才培养计划 |
| 摘 要： | 目的 克隆小鼠肺组织特异性表达基因缺氧诱导丝裂原因子(hypoxia-induced itogenic factor,HIMF),并构建其真核表达载体.方法 采用 Western blot 法检测 HIMF 基因在小鼠不同脏器中的表达;从小鼠肺组织中提取总RNA,采用 RT-PCR 法扩增全长 HIMF cDNA ,克隆至 T 载体后进行核酸序列分析,并将其正向插入到真核表达载体pcDNA3.1/Zeo( )的限制性内切酶位点 EcoR Ⅰ ;重组子在阳离子脂质体 Lipofectamine 2000 的介导下瞬时转染胚胎纤维母细胞 NIH/3T3、肺Ⅱ型上皮细胞 MLE-12、血管内皮细胞 SVEC4-10,用 Western blot 及 RT-PCR 法检测细胞HIMF表达水平.结果 HIMF特异性表达于小鼠肺组织,而其他脏器未见表达.成功克隆了小鼠 HIMF 全长 cDNA(336 bp),与 GenBank 报道的序列一致.真核表达载体 pcDNA3.1-HIMF 转染细胞后,细胞内 HIMF mRNA 和蛋白水平均显著增高(P<0.01).结论 从小鼠肺组织中克隆出 HIMF 这一组织特异性基因,为深入研究 HIMF 的生物学功能及其在肺部疾病靶向性生物治疗中的作用奠定了基础. |
| 关 键 词： | 缺氧诱导丝裂原因子 组织特异性 肺 基因表达 |
Cloning of Lung-specific Gene Hypoxia-induced Mitogenic Factor and Construction of Its Eukaryotic Expression Vector |
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| Zheng Liduan,Tong Qiangsong,Cai Jiabin et al.Cloning of Lung-specific Gene Hypoxia-induced Mitogenic Factor and Construction of Its Eukaryotic Expression Vector[J].Journal of Huazhong University of Science and Technology(Health Sciences),2008,37(4). | |
| Authors: | Zheng Liduan Tong Qiangsong Cai Jiabin |
| Institution: | Zheng Liduan1,Tong Qiangsong2,Cai Jiabin2 et al1Department of Pathology,2Department of Pediatric Surgery,Union Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science , Technology,Wuhan 430022 |
| Abstract: | |
| Keywords: | hypoxia-induced mitogenic factor tissue specificity lung gene expression |
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