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| 单纯疱疹病毒1型 US12 基因siRNA筛选及其对病毒增殖的影响 | |
| 引用本文： | 李深,任哲,王巧利,向阳飞,王一飞,胡巢凤,戚仁斌,陆大祥,张庶民,张佩琢.单纯疱疹病毒1型 US12 基因siRNA筛选及其对病毒增殖的影响[J].中国病理生理杂志,2011,27(3):528-532. |
| 作者姓名： | 李深 任哲 王巧利 向阳飞 王一飞 胡巢凤 戚仁斌 陆大祥 张庶民 张佩琢 |
| 作者单位： | 1. 暨南大学 生物医药研究开发基地,广东 广州 510632; 2. 暨南大学 医学院病理生理学系,广东 广州 510632; 3. 中国药品生物制品检定所,北京 100050; 4. 上海吉玛制药技术有限公司,上海 201203 |
| 基金项目： | 国家863资助项目，国家自然科学基金联合资助项目，植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室自主课题，开放课题 |
| 摘 要： | 目的: 筛选高效沉默单纯疱疹病毒1型(HSV-1) US12 基因的siRNA,研究siRNA沉默 US12 基因后对HSV-1增殖的影响。方法: 构建pEGFP-N1-US12融合表达质粒,设计并化学合成3对靶向 US12 基因的siRNA,与pEGFP-N1-US12融合表达质粒共转染Vero细胞,流式细胞术筛选高效抑制pEGFP-N1-US12融合蛋白的siRNA,实时荧光定量PCR检测siRNA对细胞内US12 mRNA表达水平的抑制效果,空斑减数实验评价siRNA对HSV-1增殖的抑制效果。结果: 共转染实验筛选出高效抑制pEGFP-N1-US12融合蛋白的siRNAS121、siRNAS122及siRNAS123。3对siRNA均能显著降低感染细胞US12 mRNA的表达水平,但空斑减数实验均未发现3对siRNA对HSV-1的增殖有显著抑制效果。结论: 成功构建pEGFP-N1-US12融合表达质粒,筛选到高效抑制 US12 基因表达的3对siRNA,但是对病毒的体外增殖无显著影响,表明 US12 表达的立即早期蛋白ICP47的功能可能与HSV-1体外增殖无直接相关。 |
| 关 键 词： | siRNA RNA干扰 基因 US12 单纯疱疹病毒1型 |
| 收稿时间： | 2010-09-25 |
Screening of highly efficient siRNA for silencing US12 gene of HSV-1 |
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| LI Shen,REN Zhe,WANG Qiao-li,XIANG Yang-fei,WANG Yi-fei,HU Chao-feng,QI Ren-bin,LU Da-xiang,ZHANG Shu-min,ZHANG Pei-zhuo.Screening of highly efficient siRNA for silencing US12 gene of HSV-1[J].Chinese Journal of Pathophysiology,2011,27(3):528-532. | |
| Authors: | LI Shen REN Zhe WANG Qiao-li XIANG Yang-fei WANG Yi-fei HU Chao-feng QI Ren-bin LU Da-xiang ZHANG Shu-min ZHANG Pei-zhuo |
| Institution: | 1. Biomedicine Research and Development Center,Jinan University, Guangzhou 510632, China; 2. Department of Pathophysiologg,School of Medicine, Jinan University, Guangzhou 510632, China; 3. National Institute for The Control of Pharmaceutical and Biological Products, Beijing 100050, China; 4. Shanghai Gene Pharma Co. Ltd, Shanghai 201203, China. E-mail: twang-yf@163. com;E-mail:ldx@jnu.edu.cn |
| Abstract: | AIM: To explore the influence of siRNA on the reproduction of herpes simplex virus 1(HSV-1) by screening the siRNA that has high efficiency for silencing US12 gene of HSV-1.METHODS: Three siRNAs targeting US12 gene were designed,chemosynthesized and cotransfected into Vero cells with the fusion expression plasmid pEGFP-N1-US12.Fluorescence-activated cell sorter was used to screen inhibitory effect of siRNAs on the production of fusion protein US12-EGFP.The inhibitory effect of siRNAs on the mRNA expression ... |
| Keywords: | siRNA |
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