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人源日本血吸虫Fab抗体库的构建及抗独特型抗体的筛选、鉴定
引用本文:岳国峰,张慧林,焦永军,朱 进,冯振卿,管晓虹. 人源日本血吸虫Fab抗体库的构建及抗独特型抗体的筛选、鉴定[J]. 南京医科大学学报(自然科学版), 2006, 26(11): 997-1000
作者姓名:岳国峰  张慧林  焦永军  朱 进  冯振卿  管晓虹
作者单位:南京医科大学病理系,江苏,南京,210029;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏,南京,210029
摘    要:目的:构建人源日本血吸虫Fab抗体库,筛选出日本血吸虫抗独特型抗体并进行初步鉴定。方法:以3名晚期血吸虫患者切除的脾脏为源,构建人源日本血吸虫Fab抗体库。并以日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)及成虫抗原(SWAP)免疫鼠血清IgG包板进行筛选,经ELISA鉴定后,对阳性克隆进行可溶性表达。结果:构建了人源日本血吸虫Fab抗体库,库容为4.3×106,经核苷酸序列分析,证实插入片段为Fab基因片断。经过5轮筛选后,从富集的次级抗体库中随机挑取60个克隆,用ELISA法鉴定得到4个可与免疫鼠血清(Ab1)特异性结合,而不与SEA及SWAP结合的单克隆抗体(A3、B6、C4、C17),其中B6经SDS-PAGE电泳显示插入片断正确。结论:成功构建了人源日本血吸虫Fab抗体库,并从中获得人源日本血吸虫抗独特型抗体B6,为研制用于人体血吸虫病免疫预防的抗独特型抗体疫苗奠定了基础。

关 键 词:日本血吸虫  噬菌体抗体库  抗独特型抗体  抗体Fab段
文章编号:1007-4368(2006)11-0997-04
收稿时间:2006-04-09
修稿时间:2006-04-09

Screening and identification of a human Fab antibody against idiotypic antibody from a phage-display library of schistosoma japonicum
YUE Guo-feng,ZHANG Hui-lin,JIAO Yong-jun,ZHU Jin,FENG Zhen-qing and GUAN Xiao-hong. Screening and identification of a human Fab antibody against idiotypic antibody from a phage-display library of schistosoma japonicum[J]. Acta Universitatis Medicinalis Nanjing, 2006, 26(11): 997-1000
Authors:YUE Guo-feng  ZHANG Hui-lin  JIAO Yong-jun  ZHU Jin  FENG Zhen-qing  GUAN Xiao-hong
Abstract:
Keywords:schistosoma japonicum    phage library    anti-idiotypic antibody    Fab
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