双重实时荧光定量PCR检测产志贺毒素大肠埃希菌stx1和stx2基因 |
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引用本文: | 赵爱兰,孟琼,白向宁,刘学通,刘凯,熊衍文.双重实时荧光定量PCR检测产志贺毒素大肠埃希菌stx1和stx2基因[J].临床检验杂志,2013,31(4):241-244. |
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作者姓名: | 赵爱兰 孟琼 白向宁 刘学通 刘凯 熊衍文 |
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作者单位: | 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,传染病预防控制国家重点实验室,北京 102206;中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,传染病预防控制国家重点实验室,北京 102206;中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,传染病预防控制国家重点实验室,北京 102206;中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,传染病预防控制国家重点实验室,北京 102206;中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,传染病预防控制国家重点实验室,北京 102206;中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,传染病预防控制国家重点实验室,北京 102206 |
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基金项目: | 国家“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”科技重大专项( 2011ZX10004 001)。 |
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摘 要: | 摘要:目的:建立一种检测产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)的双重实时荧光定量PCR法。 方法:根据stx1和stx2及其变种序列,设计PCR引物和TaqMan探针,建立双重实时荧光定量PCR检测体系,进行灵敏度和特异性评价,并对STEC模拟粪便标本及动物粪便标本进行检测分析。 结果:双重实时荧光定量PCR检测含志贺毒素基因重组质粒的灵敏度为1×102 copies/反应体系;该法对17种常见肠道病原菌均无特异性扩增,对47株不同志贺毒素类型及变种的已知STEC菌株的检测特异性为100%;对模拟粪便标本的检测下限为3.55×103 CFU/g;对动物粪便标本的检测阳性率高于细菌分离培养。 结论: 建立的双重实时荧光定量PCR可作为不同志贺毒素类型及变种的STEC菌株的快速鉴定方法,亦可用于人感染性腹泻标本和动物粪便标本STEC感染的快速筛查。
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关 键 词: | 产志贺毒素大肠埃希菌 实时荧光定量聚合酶链反应 志贺毒素 |
收稿时间: | 2012/10/19 0:00:00 |
修稿时间: | 3/1/2013 12:00:00 AM |
Establishment of the duplex quantitative real-time PCR method detected the stx1 and stx2 genes of Shiga toxin producing Escherichia coli (STEC) |
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Abstract: | |
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Keywords: | Shiga toxin-producing Escherichia coli quantitative real-time PCR Shiga toxin |
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