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小鼠子宫内电转基因方法的建立
引用本文:杨慈清,李小英,卢习,付苏雷,赵善廷,林俊堂. 小鼠子宫内电转基因方法的建立[J]. 解剖学杂志, 2013, 36(2)
作者姓名:杨慈清  李小英  卢习  付苏雷  赵善廷  林俊堂
作者单位:1. 新乡医学院生命科学技术学院,新乡453003;河南省医用组织再生重点实验室,新乡453003;西北农林科技大学动物医学院,杨凌712100
2. 新乡医学院生命科学技术学院,新乡,453003
3. 西北农林科技大学动物医学院,杨凌,712100
4. 新乡医学院生命科学技术学院,新乡453003;河南省医用组织再生重点实验室,新乡453003
基金项目:国家自然科学基金,新乡医学院重点研究领域招标课题
摘    要:目的:建立小鼠子宫内电转基因技术,比较分析转染绿色荧光蛋白(GFP)后对胚胎发育及相关蛋白表达的影响.方法:将怀孕15d的小鼠,水合氯醛麻醉后,取出两侧子宫,用毛细管注射针将2μg/μl的pCAGGS-GFP质粒0.5~1 μl准确注射到胎鼠侧脑室,在电压40 V、每次脉冲60 ms,间隔940 ms,电脉冲6次的条件下进行定时定位活体电转基因,电转后24 h取材,甲醛固定冷冻冠状切片,DAPI染细胞核观察组织形态结构变化,荧光免疫组织化学检测α-SMA的表达差异.结果:妊娠15d孕鼠转染24 h后小鼠成活率80%(8/10),胚胎成活率为54.2%(13/24),存活胚胎GFP阳性表达率为61.5%(8/13),GFP阳性表达胚胎脑组织切片,基因转染区域和正常组织区组织形态结构和α-SMA表达不存在差别.结论:成功建立了小鼠子宫内电转基因的方法.

关 键 词:小鼠  转基因方法  子宫内电转

Construction of in utero electroporation in the mouse
Yang Ciqing , Li Xiaoying , Lu Xi , Fu Sulei , Zhao Shanting , Lin Juntang. Construction of in utero electroporation in the mouse[J]. Chinese Journal of Anatomy, 2013, 36(2)
Authors:Yang Ciqing    Li Xiaoying    Lu Xi    Fu Sulei    Zhao Shanting    Lin Juntang
Abstract:
Keywords:
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