DNA甲基化调控DACT2在结直肠癌中的表达

目的探讨DACT2在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的表达改变及其调控机制。方法免疫组织化学(immunohistochemisty,IHC)方法检测16例CRC临床标本中DACT2的表达。PCR检测甲基转移酶抑制剂5-aza-dc处理前后CRC细胞系中DACT2 mRNA的表达,甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)、亚硫酸氢盐修饰后测序(Bisulfite sequencing,BSSQ)检测组织标本和细胞系中DACT2的甲基化状态。对比分析基因表达与甲基化的对应关系。结果 DACT2在正常结肠黏膜和癌旁组织中呈强阳性表达。与对应的癌旁组织相比,部分CRC组织中DACT2表达下调,比例为68.75%。DACT2在RKO细胞系中表达缺失,在HT-29中呈弱表达,甲基转移酶抑制剂5-aza-dc处理后表达恢复或增强。MSP、BSSQ分析显示,RKO呈完全甲基化,而HT-29、DLD-1、SW480呈部分甲基化。CRC组织标本中DACT2甲基化率为56.25%。基因启动子高甲基化与DACT2表达呈对应关系(P=0.009)。结论 DACT2表达降低可能参与了CRC的发生、发展,而DNA高甲基化是DACT2的表达调控机制之一。