纳米颗粒介导的P53联合Rb基因靶向治疗对兔VX2肝转移癌多药耐药的影响及分子机制

目的联合P53及Rb抗癌基因,通过纳米基因靶向治疗技术,探索其对肝转移癌灶多药耐药的影响及其分子机制。方法以超液化碘油及多聚赖氨酸修饰的羟基磷灰石纳米颗粒乳剂为载体,将含有野生型P53、Rb基因的重组表达质粒经肝动脉共同或者分别转运至兔VX2肝转移癌灶局部,采用蛋白质印迹法及原位激光扫描共焦显微镜确定P53及Rb共表达蛋白在转移灶的表达。通过检测肿瘤对化疗药物丝裂霉素(MMC)、5-氟尿嘧啶(5-FU)和阿霉素(ADM)的敏感性来评价疗效。最后应用实时反转录聚合酶链反应(real time RT-PCR)及电化学发光法(ECL)蛋白杂交技术检测多药耐药蛋白(PGP),多药耐药相关蛋白1(MRP1),肺耐药蛋白(LRP),乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的表达差异。结果 (1)与对照碘油组(A)和nanoplex/lipiodol组(B)相比,nanoplex-p53/lipiodol组(C),nanoplex-Rb/lipiodol组(D),nanoplex-(p53+Rb)/lipiodol组(E)PGP、BCRP、MRP1 mRNA表达均降低(P<0.05)。(2)C组及E组表现出比D组更低的PGP mRNA水平(P<0.05)。(3)E组BCRP和LRP表达水平低于C、D组(P<0.05)。(4)C、E组PGP蛋白表达显著低于A组,仅E组BCRP和LRP蛋白表达显著低于A组,C、D、E组MRP1蛋白表达均低于A组(P<0.05)。(5)C、D、E组表现出比A组更高的对化疗药ADM和MMC的敏感性;D、E组比A组更高的对化疗药5-FU的敏感性(P<0.05)。结论以Pll-n HAP为载体的P53基因协同Rb基因的纳米靶向治疗,通过调节肿瘤细胞多重耐药机制中重要基因的表达,增强了其对化疗药的敏感性。P53基因联合Rb基因的纳米基因靶向治疗有可能成为针对肝转移灶多药耐药的有效治疗方法。

Effect of nanoparticle-mediated P53 and Rb gene targeted therapy on multidrug resistance of VX2 liver metastasis in rabbits and its molecular mechanism