YAP对高糖培养大鼠心脏成纤维细胞活化作用的影响及其机制

目的 探究Yes相关蛋白(YAP)对高糖诱导的大鼠心脏成纤维细胞(CFs)增殖和转分化的影响及其作用机制。方法 分离培养1～3日龄SD大鼠CFs，用40.0 mmol/L葡萄糖诱导CFs，构建糖尿病心肌病(DCM)细胞模型，24 h后检测细胞YAP、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ)、结缔组织生长因子(CTGF)的表达水平。取原代大鼠CFs，分别设置正常糖(5.5 mmol/L D-Glucose,NG)组、高糖(40.0 mmol/LD-Glucose,HG)组、NG+维替泊芬(NG+VP)组、HG+VP组。VP为YAP抑制剂，剂量为0.5μmol/L。各组处理CFs24 h后，采用波形蛋白免疫荧光法鉴定CFs,Ki-67免疫荧光染色检测各组细胞增殖情况，Westernblotting检测各组YAP、α-SMA、collagenⅠ、collagenⅢ、CTGF蛋白表达水平。结果 免疫荧光法鉴定波形蛋白阳性，提示原代培养的细胞为大鼠CFs。Ki-67免疫荧光检测结果显示，与NG组比较，HG组CFs的Ki-67阳性率(%...