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miR-1、miR-16和miR-208前体在乳鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞中的表达
引用本文:黄帅,朱杰宁,林秋雄,符永恒,郭林林,余细勇,单志新. miR-1、miR-16和miR-208前体在乳鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞中的表达[J]. 广东寄生虫学会年报, 2012, 0(2): 123-126
作者姓名:黄帅  朱杰宁  林秋雄  符永恒  郭林林  余细勇  单志新
作者单位:[1]广东省人民医院医学研究中心,广东省医学科学院,广东广州510080 [2]汕头大学医学院,广东汕头515041
基金项目:国家自然科学基金(81070102); 广东省自然科学基金(10151008004000035)
摘    要:目的检测心肌特异的miR-1、miR-16和miR-208前体在乳小鼠、乳大鼠心肌细胞及心肌成纤维细胞中的表达。方法利用出生1~3d的Sprague-Dawley(SD)大鼠和C57BL/6小鼠,采用2.5%胰酶消化和差速贴壁法分离心肌细胞和心肌成纤维细胞。提取原代的乳小鼠、乳大鼠心肌细胞及P1代的心肌成纤维细胞总RNA,以β-actin为内参照,逆转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)分别检测miR-1、miR-16和miR-208的前体表达水平。用FluorChem8900软件分析琼脂糖凝胶电泳后PCR产物条带的灰度值,计算出表达的目的miRNA前体与β-actin的比值。结果有效分离并培养了乳C57BL/6小鼠、乳SD大鼠心肌细胞及心肌成纤维细胞。RT-PCR结果显示,在乳SD大鼠心肌细胞及心肌成纤维细胞中miR-1和miR-16均有相近水平的表达;心肌细胞中miR-208的表达显著低于miR-208b(P〈0.01),miR-208b在心肌细胞中的表达显著高于其在心肌成纤维细胞中的表达(P〈0.05)。乳C57BL/6小鼠心肌细胞中miR-1a-1的表达显著低于miR-1a-2(P〈0.01),而miR-1a-2在心肌细胞和心肌成纤维细胞中的表达水平一致;miR-16-1在心肌细胞和心肌成纤维细胞中表达水平相近,而miR-16-2在两种细胞中均不表达;心肌细胞中miR-208a和miR-208b表达水平差别不明显,心肌成纤维细胞中只有miR-208a表达,并且在水平上低于其在心肌细胞中的表达(P〈0.05)。结论 miR-1、miR-16和miR-208前体在乳小鼠、乳大鼠心肌细胞及心肌成纤维细胞中呈细胞特异性的表达。

关 键 词:心肌细胞  心肌成纤维细胞  微小RNA  半定量RT-PCR

The expression of microRNA-1, -16 and -208 precursor in neonatal mouse and rat cardiomyocytes and cardiac fibroblasts
HUANG Shuai,ZHU Jie-ning,LIN Qiu-xiong,FU Yong-heng,GUO Lin-lin,YU Xi-yong,SHAN Zhi-xin. The expression of microRNA-1, -16 and -208 precursor in neonatal mouse and rat cardiomyocytes and cardiac fibroblasts[J]. Journal of Tropical Medicine, 2012, 0(2): 123-126
Authors:HUANG Shuai  ZHU Jie-ning  LIN Qiu-xiong  FU Yong-heng  GUO Lin-lin  YU Xi-yong  SHAN Zhi-xin
Affiliation:1. Research Center of Guangdong General Hospital, Guangdong Provincial, Guangdong Academy of Medical Sciences, Guangzhou 510080; 2. Shantou University Medical College, Guangdong,Shantou 515041, China)
Abstract:
Keywords:cardiomyocyte  cardiac fibroblast  microRNAs  semi quantitative RT-PCR
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