| 从贮存20年的微量细胞中提取DNA并做PCR分析的实验研究 |
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| 引用本文： | 张俭荣,赵雍凡,陈国第,辛军平.从贮存20年的微量细胞中提取DNA并做PCR分析的实验研究[J].肿瘤预防与治疗,2006,19(3). |
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| 作者姓名： | 张俭荣 赵雍凡 陈国第 辛军平 |
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| 摘 要： | 目的:探讨从二十年前贮存的食管拉网微量细胞涂片中提取DNA并进行食管癌基因检测的方法和可行性,比较P53基因的突变在食管癌前期病变和正常食管上皮中的差异.方法:利用螯合型的离子交换树脂Chelex100作为介质,一步法从食管拉网脱落细胞提取DNA,应用PCR-SSCP方法和PCR-RFLP方法进行p53基因第5外显子及第7外显子的突变检测.结果:48例标本P53基因检测均获成功.食管上皮重度不典型增生细胞中发现有5例突变发生,均为p53基因第7外显子,而第5外显子未发现突变;正常食管鳞状上皮拉网脱落细胞中均未发现突变.检测到的5例突变中,其中有3例分别在10年、12年和14年后转变为食管癌.结论:Chelex100法能从微量细胞涂片中提取DNA,使对20年前食管拉网细胞涂片标本进行分子水平的检测成为可能.为食管癌前期病变的研究提供一种新的方法.p53基因的突变使食管上皮癌前期病变细胞具有了癌变趋势.
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| 关 键 词： | 食管拉网微量细胞 癌前病变 DNA提取 p53基因 聚合酶链反应 |
Extracting DNA From Esophageal Balloon Cells Harvested 20 Years Ago for Analyis with PCR |
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