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人淀粉样前体蛋白基因与绿色荧光蛋白融合基因筛选系统的建立
引用本文:邱昕,潘纪安,陈宇,张苏明,郭德银.人淀粉样前体蛋白基因与绿色荧光蛋白融合基因筛选系统的建立[J].中国神经免疫学和神经病学杂志,2005,12(5):287-291.
作者姓名:邱昕  潘纪安  陈宇  张苏明  郭德银
作者单位:1. 华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科,湖北,武汉,430030
2. 武汉大学生命科学院病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072
摘    要:目的 构建携带人淀粉样前体蛋白(APP)的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)载体。以利于初步筛选对APP mRNA水平作用的药物。方法 将pEGFP质粒和携带野生型APP695亚型的pXCJL经Hind Ⅲ酶切,连接.PCR初筛,酶切鉴定。进一步经测序证实。携带野生型人类APP751亚型cDNA的pCDNA3.1质粒用XbaⅠ酶切.Klenow酶填平.再用HindⅢ酶切.回收APP751片段;质粒EGFP用SmaⅠ和Hind Ⅲ酶切。将目的基因APP751片段与EGFP载体片段连接生成重组质粒.酶切鉴定.测序证实。构建好的重组质粒转染COS-7细胞.观察EGFP的表达情况。结果 APP695和APP751重组质粒上的EGFP在COS-7细胞内得以表达。结论 构建的APP—EGFP融合基因重组质粒.有助于方便、快速地初筛出作用于APP mRNA水平的药物。

关 键 词:淀粉样前体蛋白  增强型绿色荧光蛋白  Alzheimer病
文章编号:1006-2963(2005)05-0287-05
收稿时间:2004-12-10
修稿时间:2005-03-09

The Construction of a Screening System of Human Amyloid Precursor Protein and Enhanced Fluorescence Protein Fusion Gene
QIU Xin,PAN Ji-an,CHEN Yu,ZHANG Su-ming,GUO De-yin.The Construction of a Screening System of Human Amyloid Precursor Protein and Enhanced Fluorescence Protein Fusion Gene[J].Chinese Journal of Neuroimmunology and Neurology,2005,12(5):287-291.
Authors:QIU Xin  PAN Ji-an  CHEN Yu  ZHANG Su-ming  GUO De-yin
Institution:1. Department of Neurology, Tongji Hospital, Tongji Medical College of Huazhong University of Science and Technology, Wuhan Hubei 430010; 2. National Key Laboratory of Virology, College of Life Sciences, Wuhan University, Hubei Wuhan 430072, China
Abstract:
Keywords:amyloid precursor protein  enhanced fluorescence protein  Alzheimer disease
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