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ARMS实时PCR和MALDI-TOF-MS进行K-ras基因分型
引用本文:刘忠臣,郑薇薇,李庆阁. ARMS实时PCR和MALDI-TOF-MS进行K-ras基因分型[J]. 中国肿瘤, 2005, 14(4): 256-260
作者姓名:刘忠臣  郑薇薇  李庆阁
作者单位:1. 厦门中山医院,福建,厦门,361005
2. 厦门大学生命科学学院生物医学系,福建,厦门,361005
摘    要:[目的]建立K-ras基因12位密码子第一、二位点基因分型的研究模型.[方法]采用ARMS实时PCR和MALDI-TOF-MS两种方法,以自行构建的质粒DNA为模板,建立K-ras基因12位密码子第一、二位点基因分型的研究模型.[结果]在相同的扩增条件下,采用ARMS实时PCR方法,第一个位点的野生型和突变型的△Ct值至少为8,但第二个位点野生型和突变型的△Ct值仅为1~2左右.第二个位点改用MALDI-TOF-MS分型方法,采用一条公用引物和dATP,ddTTP,ddCTP和ddGTP的混和物,12密码子第二位点基因分型可以准确检测.[结论]ARMS实时PCR方法分析速度快,操作简便,但它需要合适的反应条件及高质量模板.MALDI-TOF-MS分型方法虽然步骤较多,但准确度高,反应体系稳定并具有高通量潜力.

关 键 词:基质辅助激光解吸飞行时间质谱  扩增阻碍突变系统方法  实时PCR  基因分型  K-ras基因  基因突变
文章编号:1004-0242(2005)04-0256-05

Genotyping of K-ras Alleles by ARMS Real-time PCR and MALDI-TOF-MS
LIU Zhong-chen,ZHENG Wei-wei,LI Qing-ge. Genotyping of K-ras Alleles by ARMS Real-time PCR and MALDI-TOF-MS[J]. CHINA CANCER, 2005, 14(4): 256-260
Authors:LIU Zhong-chen  ZHENG Wei-wei  LI Qing-ge
Abstract:
Keywords:MALDI-TOF-MS  ARMS  real-time PCR  genotyping  K-ras gene  gene mutation
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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