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MUC5AC特异性siRNA对胆管癌细胞株HCCC-9810增殖及凋亡的影响
引用本文:黄强,任雪峰,刘臣海,齐伟.MUC5AC特异性siRNA对胆管癌细胞株HCCC-9810增殖及凋亡的影响[J].世界华人消化杂志,2009,17(6).
作者姓名:黄强  任雪峰  刘臣海  齐伟
作者单位:安徽医科大学附属省立医院普通外科,安徽省合肥市,230001
摘    要:目的:探讨黏蛋白5AC特异性siRNA对人肝内胆管癌细胞珠HCCC-9810体外增殖及凋亡能力的影响.方法:设计合成三对特异性siRNA, 构建了三个可在哺乳动物细胞中表达siRNA的表达质粒, pRNAT-U6.1/Neo-MUC5AC-siRNA1/2/应用脂质体转染技术分别将三个稳定表达的质粒和对照质粒( 空质粒对照) 转染HCCC-9810, 应用有荧光标记的非特异性小分子的siRNA检测转染效率, RT-PCR检测黏蛋白5AC基因mRNA水平;SABC免疫组化染色技术检测黏蛋白5AC的表达;MTT检测细胞生长增殖情况;流式细胞仪分析细胞凋亡.结果:基因测序表明成功构建质粒;转染后荧光蛋白表达率28.57%;RT-PCR结果表明在mRNA水平, 三个质粒都可抑制黏蛋白5AC基因的表达, 并可使黏蛋白5AC的表达下降,MTT结果对细胞的生长有一定的抑制作用,流式细胞仪分析结果使肿瘤细胞凋亡增加.结论:构建pRNAT-U6.1/Neo-MUC5ACsiRNA1/2/3质粒明显抑制了黏蛋白5AC基因在mRNA水平及蛋白的表达, 并可抑制肿瘤细胞的生长增殖和诱导其凋亡.

关 键 词:HCCC-9810细胞  胆管癌  黏蛋白5AC  RNA干扰  细胞增殖  细胞凋亡

Construction of the specific MUC5AC-siRNA expression plasmid and effect of siRNA on proliferation and apoptosis in human bile duct cancer line HCCC-9810
Qiang Huang,Xue-Feng Ren,Chen-Hai Liu,Wei Qi.Construction of the specific MUC5AC-siRNA expression plasmid and effect of siRNA on proliferation and apoptosis in human bile duct cancer line HCCC-9810[J].World Chinese Journal of Digestology,2009,17(6).
Authors:Qiang Huang  Xue-Feng Ren  Chen-Hai Liu  Wei Qi
Abstract:
Keywords:
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