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体外IL-β诱导股骨头建立软骨退变模型
作者姓名:丁道芳  庞坚  宋奕  杜国庆  曹月龙  詹红生  郑昱新
作者单位:上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心, 上海 201203;上海市中医药研究院骨伤科研究所, 上海 201203;上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心, 上海 201203;上海市中医药研究院骨伤科研究所, 上海 201203;苏州市中西医结合医院, 江苏 苏州 215101;上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心, 上海 201203;上海市中医药研究院骨伤科研究所, 上海 201203;上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心, 上海 201203;上海市中医药研究院骨伤科研究所, 上海 201203;上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心, 上海 201203;上海市中医药研究院骨伤科研究所, 上海 201203;上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心, 上海 201203;上海市中医药研究院骨伤科研究所, 上海 201203
基金项目:国家自然科学基金 (No. 81073114,81072830,81373665);上海市教委创新项目(No. 11YZ64);上海市高校青年教师培养资助计划(No. ZZszy12017)
摘    要:目的:IL-1β诱导体外培养大鼠的股骨头致其快速退变,为药物筛选和治疗提供可靠的软骨退变模型。方法:取2周龄SD幼鼠的股骨头,左右股骨头对应为对照组和实验组,分别培养于正常培养基和诱导培养基中(其中含50 ng/ml的IL-1β),每2 d换液1次,至第3天取出股骨头,固定于4%多聚甲醛,经过脱钙和脱水、石蜡包埋、切片后经甲苯胺蓝和臧红-固绿染色及细胞免疫荧光检测软骨标志基因Ⅱ型胶原和Sox9以及软骨退变相关基因MMP13和ADAMTS5等基因的原位表达。结果:实验组的股骨头外缘,在培养3 d后甲苯胺蓝染色明显淡染,臧红-固绿染色阳性,提示软骨退变。免疫荧光显示Ⅱ型胶原和Sox9表达减弱,MMP13和ADAMTS5表达增强。结论:IL-1β培养大鼠股骨头3 d 即诱导其退变,建立软骨组织体外培养诱导其退变的模型。

关 键 词:股骨头  染色  蛋白表达  软骨退变
收稿时间:2014-10-13
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