柯萨奇病毒B3(CVB3)通过激活NADK2促进小鼠巨噬细胞NLRP3的活化

目的 研究在柯萨奇病毒B3(CVB3)刺激下，小鼠巨噬细胞中含pyrin结构域NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)表达的变化及机制。方法 CVB3刺激RAW264.7细胞、小鼠原代(骨髓来源或腹腔)巨噬细胞以及感染NLRP3短发夹RNA(shRNA-NLRP3)慢病毒的RAW264.7细胞，实时荧光定量PCR检测NLRP3和白细胞介素1β(IL-1β)表达水平；ELISA检测细胞上清中IL-1β的含量；Western blot法检测NLRP3蛋白的变化，免疫共沉淀(Co-IP)法检测NLRP3相互作用蛋白的表达。结果CVB3刺激RAW264.7细胞、骨髓来源或腹腔巨噬细胞后，NLRP3和IL-1β表达明显升高；下调NLRP3后，IL-1β分泌明显减少；NLRP3抗体Co-IP所得复合物银染，组间差异蛋白经质谱分析鉴定为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸激酶2(NADK2),证明CVB3诱导NADK2与NLRP3相互作用。结论 CVB3通过激活NADK2促进巨噬细胞NLRP3活化，增加炎症因子IL-1β表达和释放。