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人bFGF单克隆抗体的制备及MabF7对黑色素瘤B16的体外抗瘤效应
引用本文:向军俭,靳英杰,黄红亮,王宏,杨红宇,唐勇. 人bFGF单克隆抗体的制备及MabF7对黑色素瘤B16的体外抗瘤效应[J]. 中华肿瘤防治杂志, 2008, 15(1): 19-22
作者姓名:向军俭  靳英杰  黄红亮  王宏  杨红宇  唐勇
作者单位:暨南大学抗体工程研究中心,广东,广州,510632;暨南大学抗体工程研究中心,广东,广州,510632;暨南大学抗体工程研究中心,广东,广州,510632;暨南大学抗体工程研究中心,广东,广州,510632;暨南大学抗体工程研究中心,广东,广州,510632;暨南大学抗体工程研究中心,广东,广州,510632
摘    要:目的:制备抗人碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)单克隆抗体,并探讨其体外对黑色素瘤细胞B16的抗肿瘤效应.方法:以rhbFGF免疫Balb/C小鼠,用杂交瘤技术制备单克隆抗体;间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株,测定腹水型单抗的效价及其Ig亚类;用RT-PCR、细胞免疫组化和双抗体夹心等方法检测黑色素瘤B16细胞中bFGF的表达;用MTT法检测单抗MabF7对B16细胞的体外抑瘤效应;用流式细胞术及DNA琼脂糖电泳技术检测细胞凋亡.结果:共获得19株稳定分泌抗bFGF单抗的杂交瘤细胞株;ELISA效价>105;除 MabF8、MabF9为IgG2a外,其余为IgG1;黑色素瘤细胞B16中有bFGF mRNA及其蛋白的表达,且可在细胞培养液中检测到bFGF;经蛋白A纯化的MabF7对B16细胞的抑制作用呈剂量及时间累计效应,抑制率为(39±4.12)%,P<0.01.流式细胞术结果显示,随抗体浓度增加及作用时间延长,肿瘤细胞在G1期前出现明显的亚二倍体期;DNA电泳结果显示,抗体作用后的细胞DNA呈明显的梯度条带. 结论:MabF7具有体外抑制黑色素瘤B16细胞增殖作用,其机制与诱导细胞凋亡有关.

关 键 词:成纤维细胞生长因子  碱性  抗体  单克隆  黑色素瘤  实验性
文章编号:1673-5269(2008)01-0019-04
修稿时间:2007-06-05

Production preparation of human bFGF monoclonal antibodies and their antitumor activities with MabF7 on melanoma cells B16 in vitro
XIANG Jun-jian,JIN Ying-jie,HUANG Hong-liang,WANG Hong,YANG Hong-yu,TANG Yong. Production preparation of human bFGF monoclonal antibodies and their antitumor activities with MabF7 on melanoma cells B16 in vitro[J]. Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment, 2008, 15(1): 19-22
Authors:XIANG Jun-jian  JIN Ying-jie  HUANG Hong-liang  WANG Hong  YANG Hong-yu  TANG Yong
Abstract:
Keywords:
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