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| 三明治构型大鼠原代肝细胞长期培养及功能测定 | |
| 引用本文： | 王莹,张先杰,宋茂民,孙家邦,段钟平,陈煜,乔欣.三明治构型大鼠原代肝细胞长期培养及功能测定[J].传染病信息,2007,20(3):158-162. |
| 作者姓名： | 王莹 张先杰 宋茂民 孙家邦 段钟平 陈煜 乔欣 |
| 作者单位： | 1. 首都医科大学附属北京天坛医院,北京,100050 2. 首都医科大学附属宣武医院 北京 100053 3. 首都医科大学附属北京佑安医院 北京 100054 4. 首都医科大学实验动物部 北京 100050 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金 , 北京市科技新星计划项目 |
| 摘 要： | 目的观察三明治构型大鼠原代肝细胞长期培养的形态学变化,并对其功能进行测定。方法采用改良原位两步法门静脉胶原酶灌注分离单肝细胞,台盼蓝拒染实验观察细胞活力,利用三明治培养构型培养成年大鼠原代肝细胞,倒置显微镜下连续观察肝细胞的形态学变化,定期收集培养细胞上清液,检测所培养肝细胞的分泌及生物转化功能,并与单层胶原培养肝细胞比较。结果平均每个鼠肝可获取(2～3)×108个肝细胞,存活率为(93±3)%;体外肝细胞培养第3天,细胞活力、清蛋白分泌功能恢复到最佳状态;三明治构型培养第7天,地西泮24h代谢量达到最高峰。三明治构型培养的肝细胞形成肝索样结构,并逐渐形成胆小管网络;在培养的21d内,清蛋白分泌、地西泮代谢始终维持较高的水平;肝细胞形态维持可达28d以上。结论三明治构型肝细胞培养体系更接近于肝细胞体内生长环境,肝细胞可在较长时间内保持良好的形态结构和功能。三明治构型不仅可以应用于肝细胞的基础研究,而且为肝细胞移植和生物人工肝治疗肝衰竭奠定了一定的基础。 |
| 关 键 词： | 三明治构型 肝细胞 原代培养 地西泮代谢 |
| 文章编号： | 1007-8134（2007）03-0158-05 |
| 修稿时间： | 2007-04-192007-05-03 |
Long-term primary culture and functional testing of rat hepatocytes in a sandwich configuration |
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| Wang Ying,Zhang Xianjie, Song Maomin,et al.Long-term primary culture and functional testing of rat hepatocytes in a sandwich configuration[J].Infectious Disease Information,2007,20(3):158-162. | |
| Authors: | Wang Ying Zhang Xianjie Song Maomin |
| Institution: | Beijing Tiantan Hospital affiliated to Capital Medical University, Beijing 100050, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | sandwich configuration hepatocyte primary culture diazepam metabolism |
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