| 病毒白细胞介素-10的基因克隆与原核表达 |
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| 引用本文： | 连云宗,李极品,吴玉水,程烽,朱忠勇.病毒白细胞介素-10的基因克隆与原核表达[J].细胞与分子免疫学杂志,2005,21(5):661-662. |
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| 作者姓名： | 连云宗 李极品 吴玉水 程烽 朱忠勇 |
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| 作者单位： | 1. 南京军区福州总医院全军医学检验中心,福建,福州,350025;泉州市第一医院,福建,泉州,362000
2. 南京军区福州总医院全军医学检验中心,福建,福州,350025 |
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| 摘 要： | 目的:构建病毒白细胞介素IL-10(vIL-10)基因的原核表达载体并在大肠杆菌中表达。方法:以EB病毒B95-8细胞培养上清为模板,用PCR扩增EB病毒BCRF1基因。PCR产物经EcoRI和XhoI双酶切后,克隆至原核表达载体pET-28a中,以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS,在IPTG诱导下表达目的蛋白。结果:以终浓度为100μmol/L的IPTG于30℃诱导6h后,重组菌可高效表达相对分子质量(Mr)约为24000的His-vIL-10融合蛋白。结论:成功地克隆vIL-10的编码基因并在大肠杆菌中高效表达,为制备抗vIL-10单克隆抗体(mAb)、分析vIL-10结构与功能的关系提供了条件。
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| 关 键 词： | 病毒白细胞介素-10 大肠杆菌 表达 |
| 文章编号： | 1007-8738（2005）05-0661-02 |
| 收稿时间： | 2004-11-08 |
| 修稿时间： | 2005-03-21 |
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