| 细粒棘球蚴细胞外信号调节激酶基因克隆、序列分析及功能的初步鉴定 |
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| 引用本文： | 吕国栋,纪静,王俊华,李亮,王红丽,卢晓梅,王星,温浩,林仁勇.细粒棘球蚴细胞外信号调节激酶基因克隆、序列分析及功能的初步鉴定[J].中华传染病杂志,2010,28(7). |
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| 作者姓名： | 吕国栋 纪静 王俊华 李亮 王红丽 卢晓梅 王星 温浩 林仁勇 |
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| 作者单位： | 新疆医科大学第一附属医院医学研究中心,新疆包虫病基础医学重点实验室,乌鲁木齐,830054 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 从新疆株细粒棘球蚴中克隆细胞外信号调节激酶(EgERK1)基因,进行序列测定、生物信息学分析,蛋白表达及功能初步鉴定.方法 设计特异性引物,从新疆株细粒棘球蚴中提取总RNA,RT-PCR法扩增EgERK1基因,构建pET28a-EgERK1原核表达质粒,测序确定序列并进行生物信息学分析.构建正确的pET28a-EgERK1原核表达质粒,经诱导、表达EgERK1重组蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western印迹检测其生物学功能.结果 RT-PCR扩增出的条带经测序,结果显示其长度为1125 bp,编码374个氨基酸,等电点为6.34,BLAST比对结果提示为一薪基因,命名为EgERK1(EU701008).同源性比较表明,EgERK1与多房棘球绦虫ERK基因(EmMPK1)同源性为95.45%,与线虫、酵母、果蝇和人类等ERK基因的同源性为43.04%～61.88%.进化树分析发现EgERK1和EmMPK1相聚集.功能分析预测EgERK1具有ERK类激酶T-X-Y结构保守区和酶激活功能域.Western印迹显示,原核诱导表达的EgERK1重组蛋白能与抗人ERK1/2抗体发生特异性免疫反应.结论 成功克隆细粒棘球蚴EgERK1新基因,发现EgERK1重组蛋白具有与ERK1/2抗体结合的功能,为进一步研究该基因在寄生虫与宿主相互作用中的功能奠定基础.
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| 关 键 词： | 细粒棘球绦虫 细胞外信号调节MAP激酶类 基因 克隆 分子 序列分析 质粒 |
Molecular cloning, sequencing and function of extracellular signal regulated kinase of Echinococcus granulosus |
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| L Guo-dong,JI Jing,WANG Jun-hua,LI Liang,WANG Hong-li,LU Xiao-mei,WANG Xing,WEN Hao,LIN Ren-yong.Molecular cloning, sequencing and function of extracellular signal regulated kinase of Echinococcus granulosus[J].Chinese Journal of Infectious Diseases,2010,28(7). |
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| Authors: | L Guo-dong JI Jing WANG Jun-hua LI Liang WANG Hong-li LU Xiao-mei WANG Xing WEN Hao LIN Ren-yong |
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| Institution: | L(U) Guo-dong,JI Jing,WANG Jun-hua,LI Liang,WANG Hong-li,LU Xiao-mei,WANG Xing,WEN Hao,LIN Ren-yong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Echinococcus granulosus Extracellalar signal-regulatea MAP kinases Gene Cloning molecular Sequence analysis Plasmids |
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