多疣壁虎Fstl1基因表达及其在断尾损伤中的变化

目的：研究多疣壁虎卵泡抑制素相似蛋白1（Fstl1）基因的表达及其在壁虎断尾损伤再生中的变化。方法：通过对多疣壁虎断尾损伤cDNA文库克隆测序获得Fstl1基因序列,并采用ClustalX软件比较GenBank同源蛋白进行系统进化分析。用Northern blot与原位杂交分析多疣壁虎Fstl1转录本大小及其在脊髓中的表达定位。通过RT-PCR方法研究Fstl1基因在壁虎主要组织中的表达分布与壁虎断尾损伤模型中变化。结果：基因系统进化分析表明,多疣壁虎Fstl1与人类Fstl1同源性较高,为96.5%;与爪蟾同源性较低,为62.9%。Northen blot分析表明,成年多疣壁虎Fstl1脊髓转录本大小约为3.7kb。原位杂交结果显示,多疣壁虎脊髓中Fstl1的阳性信号主要存在于灰质神经元细胞及室管膜细胞;而在断尾再生2～3周尾芽中,Fstl1阳性信号广泛存在于再生尾芽的新生区未分化细胞及间充质细胞,3周尾芽中,阳性信号还存在于软骨生成区。RT-PCR结果显示,多疣壁虎Fstl1基因在壁虎脑、脊髓、心、肝、肺、肾、卵巢、尾巴、肌肉中均有表达,其在脊髓中呈高表达。在断尾损伤模型中,多疣壁虎Fstl1表达呈动态变化,其在近端脊髓组织中,损伤3天时Fstl1转录表达增高,并随后开始下降恢复;在断尾再生尾芽中,3周时Fstl1转录表达低于2周表达量。结论：Fstl1基因主要分布于脊髓灰质神经元细胞中,Fstl1在壁虎断尾损伤后近端脊髓的表达呈动态变化,在再生尾芽表达3周下调。

Expression of Fstl1 in the spinal cord and regenerating tail of Gekko japonicus