| NF-κB shRNA转染骨髓间充质干细胞对炎症因子的影响 |
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| 引用本文： | 吴颖星,杨卿,杨开祥,叶亚平,向威,郭风劲.NF-κB shRNA转染骨髓间充质干细胞对炎症因子的影响[J].骨科,2014,5(2):69-72. |
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| 作者姓名： | 吴颖星 杨卿 杨开祥 叶亚平 向威 郭风劲 |
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| 作者单位： | 吴颖星 (华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,武汉,430030)； 杨卿 (华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,武汉,430030)； 杨开祥 (华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,武汉,430030)； 叶亚平 (华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,武汉,430030)； 向威 (华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,武汉,430030)； 郭风劲 (华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,武汉,430030)； |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(项目编号：31070831) |
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| 摘 要： | 目的鉴定NF-κB/p65-shRNA质粒并转染入骨髓间充质干细胞,检测靶细胞在NF-κB通路激活时磷酸化NF-κB/p65的表达。方法用双酶电泳鉴定所得质粒。使用HP试剂将NF-κB/p65-shRNA质粒转染至小鼠BMSCs,在荧光显微镜下观察绿色荧光,并且以流式细胞术检测转染效率,最后以Western Blot检测转染后靶细胞在炎症环境下对磷酸化NF-κB/p65表达的抑制情况。结果 NF-κB/p65-shRNA质粒酶切鉴定结果与预期一致;流式细胞术检测转染效率达到52.76%;Western Blot检测在炎症环境刺激下,转染后靶细胞磷酸化NF-κB/p65表达明显降低。结论成功将NF-κB/p65-shRNA质粒转染至BMSCs中并有效表达,为进一步实验通过BMSCs修复和重建骨关节炎患者的软骨组织奠定基础。
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| 关 键 词： | NF-κB RNA 间质干细胞 骨关节炎 |
| 收稿时间： | 2013/12/11 0:00:00 |
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