知母治疗阿尔茨海默病网络药理学研究及实验验证

目的:探索知母治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法:通过网络药理学筛选知母治疗AD的活性成分、作用靶点，蛋白质-蛋白质相互作用网络构建及核心靶点分析，并进行基因本体(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。提取外周血淋巴细胞并构建淋巴母细胞样细胞系(LCL)，建立LCL-SKNMC体外细胞模型。采用MTT法和细胞计数试剂盒8(CCK-8)法分别检测SKNMC细胞和LCL的活性，7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)探针检测共培养模型中生成的活性氧，免疫荧光染色检测共培养模型中生成的β淀粉样蛋白1-42(Aβ_1-42)，蛋白质印迹法检测共培养模型中相关蛋白的表达。分别观察氧化应激、正常状态及热应激状态下N2线虫的寿命，DCFH-DA探针检测N2线虫生成的活性氧，瘫痪实验研究CL4176线虫的瘫痪时间，硫黄素S染色检测CL4176线虫咽部沉积的Aβ。结果:知母具有15个潜在活性成分及103个药物-疾病靶点，可能通过白蛋白、Akt1、肿瘤坏死因子、表皮生长因子受体、血管内皮生长因子A、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、淀粉样前体蛋白(APP)等相关靶点发...